МУТАЦИЯ alpl-1315BTEHE, КОДИРУЮЩЕМ КОФАКТОР D, ПРИВОДИТ К ЗАДЕРЖКЕ ИНИЦИАЦИИ МИТОЗА В КЛЕТКАХ С МУТАЦИЕЙ cdc25-22 У Schizosaccharomyces pombe

摘要

Тубулин-свертывающий кофактор D необходим для сборки тубулиновых гетеродимеров и, возможно, имеет дополнительные функции в клетке. Исследовано влияние кофактора D, микротрубочек и/или тубулиновых димеров на инициацию митоза у Schizosaccharomyces pombe {S. pombe). Впервые показано, что клетки S. pombe, содержащие две мутации alp 1-1315 ж cdc25-22, сохраняют высокую выживаемость при 36 deg С в течение восьми часов, в отличие от клеток с мутациейalpl-1315. Также впервые описано прохождение клеток с мутациями cdc25-22 alp 1-1315 через митоз после блокировки клеточного деления при 36 deg С. Оказалось, что после переноса на 25 deg С клетки cdc25-22 alpl-1315 имеют ~30-минутную задержку в появлении на полюсе Plol-GFP, примерно часовую — в конденсации хромосом и ~75-минутную задержку в формировании веретена деления. Таким образом, инициация митоза в клетках cdc25-22 аlpl 7-1315 задерживается по сравнению с клетками cdc25-22. Известно, что обработка клеток cdc25-22 деполимеризатором микротрубочек во время ареста приводит к предмитотическому аресту с низкой активностью комплекса, инициирующего митоз. Сравнение этих двух результатов свидетельствует о том, что причиной задержки инициации митоза в клетках cdc25-22 alpl-1315 и в клетках cdc25-22, обработанных деполимеризатором, является нарушение целостности микротрубочек и/или недостаток тубулиновых димеров в ядре. Клетки cdc25-22 alpl-1315 характеризуются очень медленным прохождением через митоз после cdc25-22-apecTa., скорее всего, вследствие того, что им приходится синтезировать димеры тубулина.