БЕЛКОВАЯ ИНЖЕНЕРИЯ УРИДИНФОСФОРИЛАЗЫ ИЗ Escherichia coli K-12. I. КЛОНИРОВАНИЕ И ЭКСПРЕССИЯ В Е. coli ГЕНОВ УРИДИНФОСФОРИЛАЗ ИЗ Klebsiella aerogenes И Salmonella typ

摘要

Клонированы гены уридинфосфорилаз (udp) из Klebsiella aerogenes и Salmonella typhimurium, сконструированы экспрессионные плазмиды и созданы высокоэффективные штаммы-продуценты соответствующих белков. Изучены ферментативные свойства продуцируемых уридинфосфорилаз в сравнении с UP-азой из Escherichia coli. Методами олигонуклеотиднаправленного мутагенеза получены мутантные формы (D5E, D5N и D5A) UP-азы из E. coli и показано, что остаток Asp5 не играет существенной роли в формировании активной формы белка.