麵用コムギの生地物性を高めるGlu-A3, Glw-A1座のloop-mediated isothermal amplification (LAMP)マ一カーの開発

摘要

日本国内におけるコムギ生産を拡大するためには，わが国での利用に適した高い品質を持った品 種の育成が必要である.種子の貯蔵タンパク質であるグルテニンは，小麦粉の生地物性を決定する キ一ファクタ一であり，グルテニンサブユニットの種類が小麦粉の品質に大きく関与している.特 にうどhへの加工用に適した粘弾性の優れた品種育成には，低分子暈おルテ^>ンサブュニット(LMW-GS)のGlu-B3座およびGlu-A3座，高分子量グルテニンサブュニット（HMW-GS)のGIu-jU 座のそれぞれについて最適な遺伝子型が組み合わされていることが重要であると考えられている. コムギの育種現場において，多数の育成個体からグルテニンサブュニットの種類を正確かつ迅速に 判別し，必要な個体を選抜するためには，グルテニンサブユニットを遺伝子レベルで調べることの できる簡便なDNAマーカーの開発が必要である.本研究では，これまで主に利用されてきたPCR 法に替わって，新たなDNA増幅法であるLAMP法を用いたDNAマーカーを開発した.グルテニン 遺伝子の塩基配列から，強い生地物性に寄与するGlu-B3座のGh-B3g遺伝子およびGlu-A3座の 遺伝子，Glu-Al座のGlu-AlaまたはGlu-Alb遺伝子を判別することのできるLAMPプライ マ一を設計すると共に，効率的に塩基配列の差異を検出するため，反応温度を68 °Cとし，さらに LAMP反応液に含まれるベタイン濃度を0.2 M (通常の4分の1)とした.ガラス繊維濾紙法により 簡易抽出したコムギDNAを用いて上記の条件でLAMP反応を行ったところ，それぞれの遺伝子を 1時間以内に正確に検出することができ，育種選抜の効率を飛躍的に向上できるものと考えられた.