蛍光ビーズ法を応用した高感度HLA · HPA抗体同B寺解析法の開発

摘要

背景：HLA . HPA抗体の検出は，血小板輸血不応症例において極めて重要である.しかし，信頼性が高くハイスループットなHLA交差適合試験法やHPA抗体検出法に関する報告はされていない.方法：高感度HLA . HPA抗体同時解析法としてビーズアレイを応用したimmunocomplex capture fluorescence analysis (ICFA)法を開発した.患者血清と反応させた血小板を可溶ィ匕し，モノクローナル抗体結合蛍光ビーズを反応させることにより'血小板膜糖タンパク質およびHLAクラスI分子のモノクローナル抗体ェピトープを介して抗原抗体複合物を特異的に捕捉した.フロー サイトメトリー解析により蛍光ビーズが捕捉した免疫複合体を検出し， 抗体特異性を判定した.結果：HLA抗体を含む血清50例およびHPA抗体を含む血清20例を用いて検討した結果，ICFA法はFlowPRA (OneLambda)と同程度の検出感度でHLA抗体を検出することが可能であった.また，本法はMPHA法より高い検出感度でHPA抗体を検出することが可能であつた.考察：ICFA法は，迅速.簡便かつ信頼性の高い，高感度HLA'HPA抗体同時解析法であり，AHG-LCT法に代わるHLA交差適合試験の標準法として期待される.