好熱性細菌Thermotoga maritima由来GH130マンノオリゴ糖ホスホリラーゼTmMOPの構造機能解析

摘要

GH130はβ-マンノシド結合の加リン酸分解及び逆反応を触媒するβ-マンノシドホスホリラーゼを中心とした酵素群であり，アミノ酸配列を基にGH130_1,GH130_2及びGH130_NCの3群に細分化される. GH130_2には，β-(1→4)-マンノオリゴ糖に特異的なβ-1,4-マンノオリゴ糖ホスホリラーゼ（MOP)と，Manβ1-4GlcNAcやManβ1-4(GlcNAc)_2に特異的なホスホリラーゼといつた，基質特異性が異なるホスホリラーゼが含まれる. MOPは二糖より三糖以上のマンノオリゴ糖によく作用するため,サブサイト+2が基質結合に重要な役割を果たすと考えられる.しかしMOPのサブサイト+2における基質認識機構は明らかではない.本研究ではThermotoga maritima由来MOP(TmMOP)とMan_3との複合体の構造解析，及びサブサイト+2に存在するアミノ酸残基の変異酵素の機能解析を行った.