Anti-oxidative activity of alveolar macrophages in endotoxemic rats

摘要

The effects of endotoxemia on the antioxidant activity in alveolar macrophages of Wistar rats were evaluated. Twenty-four male rats, 90-120 days of age, were separated into 2 groups: control and endotoxemic. To the endotoxemic animals was administered, intraperitoneally, a lipopolyssaccaride at dosage of 1mg/kg body weight. Twenty-four hours after this procedure, blood was collected for total and differential leukocytes counts. In addition, bronchoalveolar lavage was collected for total and differential leukocyte counting. From this lavage macrophages were isolated for the dosage of superoxide and superoxide dismutase. The endotoxemia increased the total leukocyte counts and the number of neutrophils in the peripheral blood and bronchoalveolar lavage of the rats. There was an increased superoxide production without changing the superoxide dismutase. Our findings indicate that endotoxemia induces lung inflammatory response. However, it does not alter the antioxidant activity in adult rats. This fact not only enhances host response against infectious agents, but might also contribute to the pathogenesis of pulmonary injury. Index terms: Antioxidant activity, oxidant activity, endotoxemia, cellular recruitment, macrophage.     INTRODUÇÃO Em linhas gerais, os eventos que decorrem da sepse e do choque séptico em modelos animais são causados por endotoxinas ou lipopolissacarídios (LPS) produzidos por bacilos Gram negativos. Essas substâncias se localizam na parte externa da parede celular bacteriana e são liberadas a partir da sua replicação e/ou morte (De Castro et al. 1997). A endotoxemia aguda, caracterizada por altos níveis de endotoxina no sangue, causa reação inflamatória com injúria endotelial, hipotensão, falência múltipla dos órgãos e morte (Hewett & Roth 1993, Sunil et al. 2002). Dentre os órgãos envolvidos no choque séptico, o pulmão é um dos mais sensíveis aos efeitos das endotoxinas e o primeiro a ser atingido (D'Acampora et al. 2001). As complicações pulmonares, incluindo edema pulmonar e falência respiratória, são as maiores causas de morbimortalidade durante a endotoxemia (Wang et al. 1994). A ativação dos macrófagos por endotoxinas induz a produção intracelular dos ânions superóxido (O2-), peróxido de hidrogênio (H2O2) e outros potentes produtos microbicidas que são responsáveis pela destruição dos microrganismos fagocitados (Meyer et al. 1994, Amersfoort et al. 2003). Em contrapartida, os compostos antioxidantes protegem os sistemas biológicos contra os efeitos potencialmente danosos de reações das espécies reativas de oxigênio com diversos alvos celulares (Mafra et al. 1999). A administração parenteral de LPS mimetiza a reação generalizada de defesa do organismo às infecções, como febre, anorexia e indução das proteínas de fase aguda no fígado (Dinarello 1996, Plata-Salamán 1996). Ademais, induz a migração de leucócitos sanguíneos para o sítio inflamatório/infeccioso. Assim, o LPS funciona como um adequado modelo para o estudo da manifestação de alterações fisiológicas durante infecções bacterianas. Considerando que o pulmão é um dos órgãos mais sensíveis aos efeitos das endotoxinas, torna-se importante a realização de trabalhos experimentais no intuito de investigar as funções dos macrófagos alveolares nesta condição. Apesar de já existirem muitos estudos sobre o recrutamento celular e a atividade oxidante em ratos tratados com LPS, ainda são escassos os conhecimentos acerca do papel do sistema de defesa antioxidante, especial-mente da superóxido dismutase, em animais endotoxêmicos. No presente estudo, pretende-se avaliar o efeito da endotoxemia sobre a atividade antioxidante de macrófagos alveolares em ratos Wistar.   MATERIAL E MÉTODOS O protocolo deste estudo foi previamente aprovado pela Comissão de Ética em Experimentação Animal do Centro de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Pernambuco (CEEA-UFPE) (Protocolo 23/05, aprovado em 9.6.2005). Animais e administração de lipopolissaccarídeo (LPS). Foram utilizados 24 ratos machos Wistar (90-120 dias), provenientes da colônia do Biotério do Departamento de Nutrição, Universidade Federal de Pernambuco (UFPE). Os animais foram mantidos em temperatura controlada (22±1?o