Detec??o de sequência 16S rRNA, específica de Borrelia, em RNA total extraído de Ixodes ricinus.

摘要

Para a detec??o de espécies de Borrelia em carrapatos, desenvolveu-se a técnica da transcri??o reversa, seguida da rea??o em cadeia da polimerase (RT-PCR). A técnica baseou-se na amplifica??o de 552 bases de nucleotídeos de 16S rRNA, utilizando-se primers específicos de Borrelia. O RNA total extraído de amostras de carrapatos Ixodes ricinus foi usado como modelo. Verificou-se maior sensibilidade da RT-PCR, para a detec??o de Borrelia, em compara??o com a microscopia de campo escuro padr?o. A especificidade da técnica foi confirmada por clonagem e sequenciamento dos 552 pares de base obtidos. A análise filogenética das sequências obtidas revelou que pertencem a B. lusitaniae e genospecies B. afzelii. A RT-PCR apresentada neste trabalho poderá ser muito útil como teste de triagem para detectar a presen?a do patógeno. Especialmente quando em investiga??es, é necessária a extra??o total de RNA de carrapatos.