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シアノバクテリア由来枝切り酵素アイソザィム3種の特性解析

机译:三种蓝细菌脱支酶同工酶的表征

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摘要

【目的】植物の澱粉生産では,枝切り酵素(EG3.2.1.68)が必須の役割を果たしている.シアノバクテリアはー般にグリ コーゲンを貯蔵多糖として蓄積するが,ごくー部の単細胞種は不溶性の澱粉様貯蔵多糖(シアノバクテリア澱粉)を蓄積 することが見出されている.Cyanothece sp. PCC 8802株は澱粉生産性シアノバクテリアであり,3種のアイソザィム (GlgX1, GlgX2, GlgX3)を持つが,それらの酵素特性はわかっていなかった.そこで本研究では,これらアイソザィム3 種の特性解析を行うことを目的とした.【方法】3種の枝切り酵素遺伝子の大腸菌内での発現系を構築し,精製酵素檁品を調製した.市販の多糖3種(ポテトア ミロべクチン,プルラン,グリコーゲン)を用いて基質特異性,至適pH,およびMgイオン濃度依存性を解析した.また. Native-PAGE活性染色法によリ活性を検出した.
机译:[目的]脱支酶(EG3.2.1.68)在植物淀粉的生产中起着至关重要的作用,尽管蓝细菌通常会积累糖原作为储存多糖, Cyanothece sp。PCC 8802是一种产生淀粉的蓝细菌,已经发现它会积累不溶性淀粉样贮藏多糖(蓝细菌淀粉),并具有三种同工酶(GlgX1,GlgX2,GlgX3)然而,它们的酶性质尚不清楚,因此,本研究的目的是分析这三种同工酶的特性[方法]研究了三种去支链酶基因在大肠杆菌中的表达系统。我们构建了一个纯化的酶试剂盒,并使用三种市售多糖(马铃薯支链淀粉,支链淀粉和糖原)分析了其底物特异性,最佳pH和Mg离子浓度依赖性。 -通过PAGE活性染色法检测反应性。

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