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Directed evolution of the PcaV allosteric transcription factor to generate a biosensor for aromatic aldehydes

机译:指导PcaV变构转录因子的进化以生成芳香醛的生物传感器

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摘要

The PCA Biosensor in . . Representation of the biosensor for detection of protocatechuic acid (PCA) is shown. Engineered chimeric promoter-operator (P ) inserted upstream from the eGFP reporter gene. PcaV binds to the promoter-operator sequence(s) repressing the expression of the reporter gene. Upon PCA binding to PcaV derepression occurs generating a fluorescent signal. PCA biosensor dose response curves. eGFP gene expression data in the absence (empty shapes) and presence of the PcaV repressor (filled shapes), for the P (red triangles) and P (green squares) versions of the PCA biosensor in . . Titration curves for active screened compounds using the P version of the PCA biosensor in and their respective effector. The fluorescent gene expression normalized to cell density (RFU/OD ) is shown relative to increasing concentrations of the effector. Each value represents the mean and standard deviation of 3 biological replicates
机译:体外PCA生物传感器。 。显示了用于检测原儿茶酸(PCA)的生物传感器的表示。在eGFP报告基因上游插入的工程嵌合启动子-操纵子(P)。 PcaV与抑制报告基因表达的启动子-操纵子序列结合。在PCA与PcaV结合后,会发生抑制,从而产生荧光信号。 PCA生物传感器剂量反应曲线。对于PCA生物传感器的P(红色三角形)和P(绿色正方形)版本的eGFP基因表达数据,不存在(空形状)和存在PcaV阻遏物(实心形状)。 。使用PCA生物传感器的P版本及其各自的效应子的活性筛选化合物的滴定曲线。相对于效应物浓度的增加,显示了相对于细胞密度(RFU / OD)标准化的荧光基因表达。每个值代表3个生物学重复的平均值和标准差

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