沉默GOLPH3对人胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及机制

摘要

cqvip:目的探讨沉默GOLPH3对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法设计3对靶向GOLPH3的shRNA,通过脂质体介导的方法转染人胃癌BGC-823细胞,采用qRT-PCR和Western blot检测BGC-823细胞转染前后GOLPH3 mRNA和蛋白表达水平的变化,划痕实验和侵袭实验法检测细胞迁移和侵袭能力的变化,qRT-PCR检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA的表达水平,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。结果与转染无关序列质粒的NC-shRNA组比较,GOLPH3-shRNA1、GOLPH3-shRNA2、GOLPH3-shRNA3组GOLPH3 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05);与GOLPH3-shRNA1组比较,GOLPH3-shRNA2组、GOLPH3-shRNA3组GOLPH3 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05);划痕后24h,GOLPH3-shRNA1组细胞愈合率(13.2±2.0)%,明显低于NC-shRNA组的(40.37±5.37)%(P<0.05);GOLPH3-shRNA1组细胞穿过基底膜的细胞数(67.0±7.2)个,明显少于NC-shRNA组(110.0±9.5)个(P<0.05);GOLPH3-shRNA1组细胞,MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平分别为0.49±0.04和0.69±0.04,均低于NC-shRNA组的1.00±0.08和1.00±0.04(均P<0.05);与NC-shRNA组相比,GOLPH3-shRNA1组Active-MMP-2、pro-MMP-9活性分别下降44.2%和29.9%(均P<0.05)。结论沉默胃癌细胞BGC-823中GOLPH3的表达可抑制细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与降低MMP-2、MMP-9的表达及活性有关。