人肝脏F蛋白放射免疫分析方法的建立及其临床意义

摘要

目的 建立人血清肝脏F蛋白的放射免疫分析方法(RIA),初步探讨其在肝脏疾病中的临床意义.方法 通过低温超速离心、层析分离等电聚焦方法,纯化人肝脏F蛋白并保留了原有的免疫活性;用常规方法免疫兔子,得到多克隆抗体;纯化的F蛋白用Iodogen法125I标记;建立放免药盒.测定116例正常人和167例不同疾病患者的血清F蛋白浓度.结果 抗血清亲和常数Ka值为1.33×1010L/mol,F蛋白的标记率为34.8%,放化纯度为92.0%,比活度为3548GBq/g,标准曲线ED50为(22.39±4.15)μg/L,非特异性结合率(NSB)＜5.0%,灵敏度为1.26μg/L;批内CV为4.1%,批间cV为8.5%;回收率为(98.77±2.87)%,工作范围为0～80μg/L,正常人血清中F蛋白水平浓度为(14.52±4.15)μg/L,肝细胞损伤时血清F蛋白水平显著升高(P＜0.01).阳性检出率原发性肝癌85.4%、急性肝炎89.2%、酒精性肝炎79.6%、肝硬化64.5%. 结论 该方法可测范围广、灵敏度高、特异性强、重复性好、非特异性结合率低.当肝细胞损伤时,血清F蛋白浓度明显升高,因此,RIA测定血清F蛋白极有可能成为一种反映肝细胞损伤程度的灵敏的和特异的新指标.