检测脂肪酸化胰岛素放射免疫分析方法的建立

摘要

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、操作简单快捷的放射免疫分析法(RIA),用于检测比格犬血浆中的脂肪酸化胰岛素.方法:所用试剂盒主要以豚抗胰岛素抗体为主要特异性试剂,利用均相竞争抑制原理,采用平衡竞争法对比格犬血浆进行直接测定.在该系统中加入未标记的标准品或样品,则标记抗原和非标记抗原将竞争有限且定量的抗体结合位点.结果:建立了检测脂肪酸化胰岛素的RIA法并进行了确证,方法的线性范围为3.125～800 μU/mL,最低检测限为3.125 μU/mL,批内和批间精密度分别为4.5％～7.0％和3.9％～7.6％,冻融稳定性和稀释稳定性等良好.结论:方法学确证结果表明,本研究建立的脂肪酸化胰岛素RIA检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于脂肪酸化胰岛素在临床前药代动力学试验的检测.