白藜芦醇对TGF-β1介导的肾小管上皮细胞表型转化和Hedgehog信号的影响

摘要

目的 探讨白藜芦醇(Res)对转化生长因子-β1(TGF-β 1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转化(EMT)的影响及其分子机制.方法 体外培养肾小管上皮细胞,分为对照组、诱导组(TGF-β 1∶5 μ g/L)、干预1组(TGF-β 1+ Res10 μ mol/ml)和干预2组(TGF-β 1+ Res100μ mol/ml).采用细胞免疫荧光和qRT-PCR技术检测EMT、细胞外基质和Hedgehog信号相关分子表达水平.结果 TGF-β 1作用NRK-52E细胞后,不仅促进其受体TGF-β 1R表达(P＜0.05),且肌成纤维细胞标志物(α-SMA)和基质成分Ⅲ型胶原的表达增加,上皮细胞标志物(E-cadherin)表达下降.应用Res干预后,不仅抑制甚至逆转了上述结果,且抑制了TGF-β1介导的MMP-2/TIMP-2比值下降(P＜0 05),促进基质成分降解.此外,Res也抑制TGF-β 1诱导的PCNA表达上调(P＜0.05),以及增殖相关的Hedgehog信号(Shh、Ptch1和Gli1)活化(P＜0.05).结论 Res可能通过拮抗Hedgehog信号来抑制TGF-β1所诱导的NRK-52E细胞增殖、EMT和细胞外基质累积.