PDTC对惊厥持续状态大鼠海马细胞凋亡及TLR4、caspase-3表达的影响

摘要

目的观察大鼠惊厥持续状态后海马中Toll样受体4(TLR4)、NF-κB和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的动态表达及神经细胞凋亡的变化,探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对惊厥后脑损伤的可能保护机制.方法将106只SD大鼠随机分为0.9％氯化钠组(A组)、SC组(B组)和PDTC组(C组),B组根据大鼠惊厥后处死时间(4、24、48和72h),分为B1～B4组,B组和C组大鼠惊厥持续状态模型的制作采用氯化锂-匹罗卡品法,C组在大鼠制模成功后,每天腹腔注射PDTC(100mg/kg)1次,连用3d,于惊厥后72h处死.电镜观察海马超微结构改变;免疫组化法测定大鼠海马NF-κ B/p65的表达;RT-PCR法检测海马TLR4、caspase-3 mRNA表达的动态变化;TUNEL法检测神经细胞凋亡数的变化.结果B组大鼠海马神经元超微结构损伤存在动态变化,72h内病变进行性加重;C组大鼠病理改变较B4组减轻.B1～B4组海马神经元胞核内有不同程度NF-κ B/p65的表达,且较A组明显升高(P＜0.05或0.01).C组较B4组NF-κ B/p65表达明显下降(P＜0.01).B1～B4组TLR4、caspase-3 mRNA的表达量均高于A组(P＜0.05或0.01),且随时间延长逐渐升高,72h达到高峰;C组TLR4、caspase-3 mRNA的表达较B4组明显降低(P＜0.05).B组在惊厥24h后海马CA1区TUNEL阳性细胞数已明显高于A组(P＜0.01),72h达高峰,而C组TUNEL阳性细胞数较B4组明显下降(P＜0.01).结论惊厥持续状态后大鼠海马TLR4、NF-κ B/p65和caspase-3的表达增强.NF-κB抑制剂PDTC可以下调TLR4和caspase-3的表达,并使神经细胞凋亡减轻;提示TLR4/NF-κ B信号通路在惊厥后海马细胞凋亡的发生、发展过程中起促进作用.