介藜芦碱调控miR-132-3p/FOXN3轴抑制胃癌细胞迁移、侵袭机制研究

摘要

目的探讨介藜芦碱对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的作用及分子机制。方法以人胃癌细胞NCI-N87为模型,设置对照组(1%DMSO)、介藜芦碱低剂量组(10μg/mL)和高剂量组(30μg/mL),Edu实验检测细胞增殖、Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;细胞免疫荧光以及蛋白免疫印迹实验检测EMT相关标志物表达水平;定量PCR检测介藜芦碱对胃癌细胞miR-132-3p及其靶基因Fork Head Box N3(FOXN3)表达的影响。结果Edu增殖实验显示,介藜芦碱对胃癌细胞增殖能力影响不明显(P>0.05),而Transwell实验显示,介藜芦碱能明显抑制胃癌细胞迁移[(0.53±0.27)、(0.32±0.14)比(1.00±0.18),P均<0.05]和侵袭[(0.63±0.17)、(0.42±0.16)比(1.00±0.09),P均<0.05];蛋白免疫印迹结果显示,介藜芦碱升高E-cadherin表达[(1.36±0.08)、(1.67±0.12)比(1.00±0.15),P均<0.05],降低Vimentin[(0.51±0.12)、(0.26±0.09)比(1.00±0.08),P均<0.05]和ZO-1表达[(0.76±0.09)、(0.33±0.10)比(1.00±0.11),P均<0.05],细胞免疫荧光结果与以上结果一致;定量PCR结果显示,介藜芦碱处理胃癌细胞明显抑制miR-132-3p表达[(0.46±0.22)、(0.36±0.19)比(1.00±0.03),P均<0.05],同时促进其靶基因FOXN3表达增加[(1.52±0.07)、(2.30±0.03)比(1.00±0.19),P均<0.05]。结论介藜芦碱可能通过调控miR-132-3p/FOXN3轴,抑制胃癌细胞迁移、侵袭和EMT能力。