基于效液相色谱法测定参附注射液中人参皂苷的浓度

摘要

cqvip:目的:评价高效液相色谱法(HPLC)指纹图检测方法测试参附注射液中人参皂苷的浓度。方法:采用Agilengt-1100高效液相色谱仪进行试验研究,色谱柱选用Agilent的ZORBAXSB-C18柱,具体参数为5μm×250mm×4.6mm,柱温为30℃,进样量为10μL,选择流动相的条件是在A流动相水和B流动相乙腈中以1mL/min的流速进行HPLC研究。分别对HPLC方法学的严谨性进行检测,包括专属性试验、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、线性回归试验、加样回收率试验等逐步建立方法的科学性;而后进一步采用HPLC对参附注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的浓度进行具体的检测和统计分析。结果:专属性结果显示4种人参皂苷(Rg1、Re、Rb1、Rd)均具有良好的分离度,拖尾因子均在0.98~1.04范围。线性回归方程:人参皂苷Rg1为Y=11278X-54.71,人参皂苷Re为Y=3633X-36.34,人参皂苷Rb1为Y=8640X-4.18,人参皂苷Rd为Y=7088X+35.03,所有人参皂苷相关系数均>0.999,结果显示人参皂苷线性关系良好。人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd峰面积的RSD分别为1.23%、1.28%、1.33%、1.20%、1.35%,结果表明HPLC具有良好的精密度。人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的峰面积RSD分别为0.44%、0.75%、0.25%、0.85%;结果表明参附注射液供试品溶液在24h内稳定。人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的RSD分别为1.18%、1.47%、1.86%、1.59%、1.30%,结果显示HPLC具有良好的重复性。加样回收率,人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的RSD分别为1.82%、1.04%、1.54%、2.07%,结果显示加样回收率均良好。不同批次参附注射液中人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的浓度存在较大差别。结论:高效液相色谱法检测不同批次参附注射液中人参皂苷的浓度存在较大差异。