基于ERK/MAPK信号通路探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用的研究

摘要

目的:探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用及对细胞外调节蛋白激酶(extracellu-lar regulated protein kinase,ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响.方法:选用SW480人结肠癌细胞株,设对照组、空白组及青藤碱不同剂量组,分别采用相应药物进行处理.采用CCK-8法检测青藤碱对SW480细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞术分析青藤碱对SW480细胞凋亡的影响,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组SW480细胞B淋巴细胞瘤2(B lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cyste-ine-containing aspartic acid proteolytic enzymes-3,Caspase-3)、细胞外调节蛋白激酶1/2(extra-cellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)蛋白表达水平.结果:干预24、48、72 h后,与对照组比较,青藤碱4、8、16、20 mmol/L组SW480细胞增殖抑制率较高,且青藤碱4 mmol/L组<8 mmol/L组<16 mmol/L组及20 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,青藤碱4、8、16 mmol/L组SW4800细胞凋亡率较高,Bax、Caspase-3蛋白表达水平较高,且青藤碱4 mmol/L组<8 mmol/L组<16 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,青藤碱4、8、16 mmol/L组BcL-2、p-ERK1/2蛋白表达水平较低,且青藤碱4 mmol/L组>8 mmol/L组>16 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:青藤碱能剂量依赖性抑制SW480结肠癌细胞增殖活性,促进细胞凋亡,其作用可能与抑制ERK/MAPK信号通路活性,调节BcL-2、Bax、Caspase-3等相关凋亡蛋白表达有关.