小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的克隆和序列测定

摘要

目的克隆并测定小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因上游启动子的序列.方法提取成年Balb/e鼠基因组DNA,设计引物,通过聚合酶链反应(PCR)得到小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列.再将目的片段定向连入T载体,酶切鉴定并测序.结果将小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子序列分3段克隆,分别得到997 bp、1004bp及674bp大小的目的片段.连人载体后,酶切结果测定重组质粒成功.其测序结果与小鼠基因组染色体位置5q21处的相应序列99%一致.结论成功克隆到牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列,为进一步研究DSPP基因的转录调控机制奠定了基础.