小鼠牙本质涎磷蛋白5′端非编码区启动子报告基因载体的构建和分析

摘要

目的:克隆小鼠牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因启动子,构建含DSPP启动子不同片段的报告基因载体,在小鼠成牙本质细胞系MDPC-23中分析各种载体中DSPP启动子活性.方法:PCR、报告基因载体构建、瞬时转染和报告基因检测.结果:PCR获得DSPP启动子的3个不同片段,将它们克隆到萤火虫荧光素酶报告基因载体pGL3-Enhancer,构建出3种含DSPP启动子不同片段的报告基因载体,将这些报告基因载体瞬时转染至MDPC-23细胞,载体中的启动子具有不同的活性.结论:成功构建了含小鼠DSPP启动子片段的报告基因载体,为以后研究DSPP基因表达调控的分子机制提供了实验工具.