分泌蛋白二氢二醇脱氢酶的蛋白组学鉴定及其在非小细胞肺癌中的研究

摘要

目的:鉴定非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的分泌蛋白,以期为肺癌血清标志物的筛选提供候选分子.方法:培养NSCLC的A 549细胞系细胞,收集其培养液中的蛋白,应用蛋白质组学和质谱分析方法鉴定.鉴定的蛋白采用Western印迹进一步验证.收集15例NSCLC癌组织及远处正常肺组织,采用RT-PCR、Western印迹法及免疫组织化学方法检测其在癌组织及肺组织中的表达差异及表达部位.收集血清104例,其中NSCLC患者64例、肺部良性肿瘤20例,健康人20例,应用ELISA检测血清中该分泌蛋白的变化.结果:在A 549细胞的培养液中鉴定并证实存在二氢二醇脱氢酶(dihydrodiol dehydrogenase,DDH).RT-PCR、Western印迹法及免疫组化检测发现:与正常肺组织比较,癌组织中有DDH mRNA和蛋白的高表达(P＜0.05),胞质和胞膜中均有DDH蛋白的丰富表达.血清ELISA检测提示,NSCLC患者血清中DDH浓度较肺部良性肿瘤患者及健康人高(P＜0.05).结论:DDH在肺癌组织中高表达,且非小细胞肺癌患者血清中浓度升高,是非小细胞肺癌的分泌蛋白型血清标志物.