抗肺癌单抗5F—11噬菌体抗体库的构建及表达

摘要

目的：构建人抗肺癌单抗5F－11的噬菌体显示文库，方法：利用RP－PCR方法从5F－11杂交瘤细胞扩增抗体轻重可变区基因。以连接子连接成为ScFv基因后克隆至载体pCANTAB5E。以肺腺癌细胞系A2为抗原体进行了4轮筛选，得到富集的次级噬菌表达文库。结果：制备了库容为8×107pfu/ml的噬菌体展示文库。随机抽取未经筛选的克隆进行酶切，酶切图谱呈多样性，富集后的酶切图谱显示特异构型的噬菌体得到富集，检测30个菌体克隆上清，其中22个与A2细胞有较强反应。