健脾敛疮方对溃疡性结肠炎小鼠保护作用的机制研究

摘要

目的:通过建立质量分数40 g/L葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)模型,探讨花生四烯酸通路在健脾敛疮方对UC的作用。方法:选用C57BL/6小鼠50只,分为正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪组、中药高剂量组、中药低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组复制UC模型,饲喂40 g/L DSS。造模开始的同时进行灌胃给药,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪溶液0.42 g/kg体质量,中药高、低剂量组分别给予健脾敛疮方药液16.6,8.3 g/kg体质量,正常对照组和模型对照组给予去离子水,灌胃体积均为0.02 mL/g,1 d 1次,共7 d。末次给药2 h后,取血,处死小鼠,观察结肠组织进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)判定,苏木精-伊红染色观察病理组织变化,酶联免疫吸附法检测组织中前列腺素E_(2)(PGE_(2))、白三烯B4(LTB4)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化情况,蛋白免疫印迹法和聚合酶链反应法检测各组结肠组织中环氧合酶-2(COX-2)和5-脂氧化酶(5-LOX)蛋白和信使核糖核酸(mRNA)含量的变化。结果:与模型对照组对比,美沙拉嗪组、中药高剂量组小鼠结肠长度变长(P<0.05),CMDI值变小(P<0.05)。与模型对照组对比,美沙拉嗪组、中药高剂量组PGE_(2)、LTB4、IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05)。各给药组小鼠结肠组织病变与模型对照组比均有不同程度的减轻。各给药组小鼠结肠组织中5-LOX、COX-2蛋白和mRNA表达均有不同程度地降低。结论:健脾敛疮方对DSS诱导的UC小鼠具有保护作用,作用机制可能与其抑制AA代谢的限速酶5-LOX、COX-2的表达从而降低LTB4、PGE_(2)有关。