超声波转化方法将外源性质粒导入甾短杆菌的研究

摘要

目的:建立甾短杆菌的高效超声波转化方法,为利用甾短杆菌重组表达功能基因提供方法基础.方法:采用超声波诱导的方法把外源DNA转化进甾短杆菌基因组中.通过对甾短杆菌生长状态,超声波作用条件等影响因素进行探索.结果:当采用OD600为0.7的菌体制备感受态细胞、超声波强度为400W、作用时间为40min和质粒浓度为0.2 g/L时,转化效率达到最大值,为384个转化子/μg DNA.经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆.结论通过优化超声波转化条件,从而获得了高效电转化技术方法.