YPEG-rhIFN-α2a修饰位点结构解析

摘要

目的 对Y型PEG化重组人干扰素α2a的PEG修饰位点进行了相关研究.方法 首先采用HPLC SP方法对YPEG-rhIFN-α2a的不同修饰位点组分进行分离;然后用TPCK胰酶酶切rhIFN-α2a和YPEG-rhIFN-α2a,通过HPLC-RPC法分离酶切肽段,进而用质谱法(MALDI-TOF MS)解析rhIFN-α2a肽段,获得rhIFN-α2a完整的TPCK胰酶肽图信息;最后对比分析rhIFN-α2a和YPEG-rhIFN-α2a的HPLC-RPC TPCK胰酶肽图,结合N-端氨基酸序列测定法测定PEG肽段的氨基酸序列,确认YPEG-rhIFN-α2a的PEG修饰位点.结果及结论 结果表明,YPEG-rhIFN-α2a的PEG修饰位点主要为Lys134和Lys31.