Dicamba对高粱成熟胚愈伤组织诱导及继代的影响

摘要

[目的]高粱是遗传转化最困难的作物之一,主要原因是由于高粱组织培养愈伤诱导及再生频率较低,高效再生体系建立比较困难,研究并使用新的植物诱导激素是改变这一困境的重要手段.[方法]以4个基因型的高粱种子(成熟胚)为外植体,高粱组织培养常用的诱导激素2,4-D为对照,研究Dicamba对高粱愈伤组织诱导、继代及愈伤组织再生质量的影响,经过统计分析,建立并优化高粱组培再生体系.[结果]高粱各基因型在不同浓度Dicamba的诱导培养基上出愈率在24.7％～90.7％,不同浓度的2,4-D诱导培养基上,出愈率为72.5％～90.5％,最高出愈率为88BP28,在Dicamb 7.5 mg·L-达到90.7％,2,4-D在2.5 mg·L-1时达到90.5％;继代培养与初代诱导培养比较,各基因型材料的褐变率均随着继代次数的增加而增加.Is-623在继代培养中,Ⅰ型愈伤组织向Ⅱ型和Ⅲ型愈伤组织转变的E值最高,达到20.1％;4种基因型以5 mg·L-1 Dicamba诱导的Is-623胚性愈伤率最高,达20.7％;不同处理中,所有基因型材料U值均在60％～ 100％.[结论]利用Dicamba对高粱成熟胚进行初代愈伤组织诱导,出愈率与2,4-D诱导差异不显著,在继代培养及胚性愈伤组织分化试验中,Dicamba作为激素更有利于Ⅱ型愈伤组织及胚性愈伤组织的形成,其效果优于2,4-D;高粱成熟胚诱导愈伤组织及胚性愈伤组织的发生受基因型影响较大,材料Is-623在Dicamba 5 mg·L-1时比其它材料的胚性愈伤发生率高,且褐化率及死亡率均较低;证实了高粱成熟胚胚性愈伤组织的形成绝大多数来自Ⅱ型愈伤组织.