甘薯腐烂茎线虫重组酶聚合酶扩增方法的建立与应用

摘要

[目的]本文以甘薯腐烂茎线虫ITS序列基因片段为靶标,建立了一种针对该线虫的RPA检测方法.[方法]RPA检测反应使用TwistAmp@Basic Kit,分别对甘薯腐烂茎线虫群体、单条线虫以及甘薯组织或土壤中的线虫进行特异性和灵敏度检测.[结果]RPA方法可特异性鉴定甘薯腐烂茎线虫群体、单条线虫以及甘薯组织或土壤中的线虫.甘薯腐烂茎线虫基因组DNA和单条线虫的检出限分别为10-2 ng/μl和1/100条,与普通PCR检测灵敏度相当.[结论]RPA技术是一种耗时短、灵敏度高、稳定性强的甘薯腐烂茎线虫分子鉴定技术.