分子诊断

摘要： 阿尔兹海默症是当今世界面临的最严重的神经退行性疾病之一。阿尔兹海默症患者的大脑表现出两种主要的神经病理改变:老年斑和神经纤维缠结,其典型临床症状包括记忆丧失、情绪改变、认知能力下降、说话、写作、行走困难等。阿尔兹海默症的早期诊断对通过早期干预策略延缓疾病或改变疾病进程甚至预防疾病都至关重要。该文综述了与阿尔兹海默症相关的蛋白、基因、miRNA、补体系统、激肽系统以及金属离子等生物标志物,总结了现阶段阿尔兹海默症的临床诊断方法和检测试剂盒。由于目前临床诊断方法的有创性和高昂的费用,迫切需要简单快速、创伤性小的分子诊断技术。该文列举了基于免疫反应、荧光、探针成像、电化学、纳米材料和miRNA等发展的新型检测技术,这些分析手段为阿尔兹海默症的早期诊断提供了强有力的技术支持。

摘要： 在口腔、食管和结直肠癌病灶中,TATA序列结合蛋白相关因子1(TATA-box binding protein associated factor 1 like,TAF1L)、stomatin家族蛋白1(stomatin-like protein 1,STOML1)和stomatin家族蛋白2(stomatin-like protein 2,STOML2)存在异常表达.为探究它们在消化系统癌变过程中的作用机理,利用6种消化道肿瘤(食道、胃、结肠、直肠、肝脏和胰腺)及癌旁组织的微陈列芯片,通过多重免疫组织化学染色,比对分析TAF1L、STOML1和STOML2这3种蛋白质在癌与癌旁组织的差异表达及与癌变的关联.结果发现,STOML2在食道、胃、结肠、直肠、肝脏和胰腺这6种消化系统癌组织中均呈显著性高表达(P<0.001),而同一家族成员STOML1则仅在食管癌和肝癌组织中表达明显增高(P<0.005).另外,除胰腺癌灶外,TAF1L在其余5种消化系统癌组织中也呈现高表达(P<0.005).同时,TAF1L、STOML1和STOML2这3种蛋白质均与上皮间充质转化的关键蛋白质MMP9有共定位现象.由此表明,3种蛋白质TAF1L、STOML1和STOML2在多种癌组织中可能具有广泛的促癌作用.由于3种蛋白质在多种癌组织的表达水平不同,说明它们各自存在着组织特异性,且具有不同的功能使命,需进一步研究TAF1L、STOML1和STOML2这3种蛋白质在消化系统恶性肿瘤发生发展过程中各自的分子病理学潜能,如能将它们打造成用于精准诊疗和预后判断的新型分子标志物,此研究结果将有重要的临床意义.

摘要： 先天性无虹膜症是一种眼部虹膜组织高度发育不良导致视功能严重异常的遗传病,其发病机制非常复杂,主要与调控虹膜发育的基因表达有关,其中最重要的调控基因是人类配对盒基因6(PAX6)。在眼部发育过程,PAX6由于各种原因发生基因突变导致表达异常,引起虹膜组织先天发育不良,导致无虹膜症的发生,严重影响人类视觉功能。随着分子生物学技术的发展,对于先天性无虹膜症致病基因PAX6的研究有很大的进展,本文对先天性无虹膜症的主要致病基因PAX6基因及其分子诊断方法作一综述,以期为先天性无虹膜症的基因靶向治疗提供理论基础。

摘要： 目的建立马达里亚加病毒(Madariaga virus,MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法从GenBank中下载MADV基因序列,根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针,利用体外转录的RNA标准品建立了MADV的绝对定量分析模型,并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证。结果该检测方法的灵敏度为1.0×10^(2)拷贝/反应,与其它虫媒病毒无交叉反应,重复性检测变异系数均小于1.5%。通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定,检测结果均为阴性。结论成功建立了MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法,可应用于实验室的早期检测。

摘要： 簇状规则间隔短回文重复序列(CRISPR)和CRISPR相关蛋白(Cas)不仅在基因工程领域炙手可热,而且正发展成为核酸精准检测领域的新利器。得益于Cas蛋白对核酸序列的特异性识别以及部分Cas蛋白的附属切割活性,Ⅱ类CRISPR/Cas系统在体外诊断及现场即时检测领域独具优势。该综述简要介绍了CRISPR/Cas系统的工作机理,重点总结了近3年基于不同信号读出方式的CRISPR/Cas生物传感平台在分子诊断领域中的应用。

摘要： 病毒性传染病尤其是新发和再发病毒性传染病一直是人类和动物健康的重大威胁,而开发准确、快速、便捷的诊断方法有利于病毒性传染病的有效防控。CRISPR-Cas系统是当前应用广泛的基因编辑技术。近年来,有些类型CRISPR-Cas系统已在传染性病原微生物的分子诊断方面展现出巨大潜力,其与核酸扩增、荧光标记等技术结合建立的检测方法准确、灵敏度高、操作简便,不需要很复杂的设备,适宜用于疫病的现场快速诊断。论文综述了CRISPR-Cas系统Ⅱ型CRISPR-Cas9、Ⅴ型CRISPR-Cas12和Ⅵ型CRISPR-Cas13技术的作用机制及其在病毒性传染病诊断中的应用,以期为病毒性传染病的诊断和防控提供参考。

摘要： 地中海贫血(简称“地贫”)是最常见的单基因遗传病之一,世界范围内大约有5%的人群有异常血红蛋白病,其中2.9%是地贫引起的。每年约有300000~400000例异常血红蛋白疾病的婴儿出生;。在中国,地贫存在地区差异性分布,其中以“两广”及海南为高发区,广东省α和β地贫的人群基因携带率分别是8.53%和2.54%。

摘要： 自动化核酸提取技术对于核酸扩增和高通量测序等分子检测应用至关重要。当前,大部分商用自动化核酸提取仪主要以磁分离技术为主,采用高度集成的封闭式结构设计方案,成本高,且不利于在资源有限的环境下使用。此外,核酸样本处理功能模块一旦固定,便很难根据需要对其功能更新和拓展。为了应对上述挑战,该文在基于“快速复制原型机(RepRap)”开源项目的低成本3D打印平台上,设计并构建了一套桌面式8通道自动化核酸提取系统。采用RepRap开源设计,系统模块功能的设计更快速、灵活,可编程,可以根据需要及时进行迭代更新,缩短了系统的研制和测试周期。在开发的系统中,加热、机械运动和8通道磁分离模块功能可与开源3D打印硬件无缝集成。其中,将8通道磁分离模块直接替换3D打印平台的热挤出机,通过G-code编程,可实现自动化核酸提取的高精度定位和机械运动控制。此外,该系统为自动化核酸提取开发了专用实验方案和控制软件。其中,三轴运动平台和核酸提取模块分别由上位机和模块驱动电路进行有效控制;加热模块由4个专门设计的铝制加热底座和3D打印机原有的加热板组成。加热底座通过与96深孔板适配,使深孔板贴合在加热板上,可实现较高的热转换效率。该研究以λDNA为标准核酸样品,对系统的核酸提取纯度、提取效率(一致性和稳定性)进行分析,验证了系统的提取性能。结果显示,该系统对高浓度样品的提纯性能和效率优于低浓度样品。该系统还实现了大肠杆菌细胞质粒DNA的自动提取,进一步展示了其对于真实细胞样本纯化的有效性。该文研制的核酸提取系统有望为在实验室之外的资源有限环境中进行现场快速分子检测(POCT)提供一种经济有效的手段。

摘要： 分子诊断为遗传病诊断的重要手段,因其具有直接诊断性、高特异性、灵敏性、早期诊断性的特点,弥补了表型诊断的不足而被广泛应用。遗传病的分子诊断是利用分子遗传学技术在DNA或RNA水平上对某一基因进行突变分析,从而对特定疾病进行诊断。分子诊断技术包括传统的细胞遗传学技术和现代分子诊断技术。常规的细胞遗传学技术包括染色体核型分析、荧光原位杂交技术等,而现代分子诊断技术主要有染色体微阵列分析、一代测序、高通量测序及质谱分析等,每一种技术都有其优缺点,只有将其有效整合,优势互补,才能最大程度识别遗传病的变异类型,真正实现疾病的早发现、早诊断和早治疗,使患者获益。

摘要： 实习是检验医学本科生职业生涯的开始,对其知识体系和技术体系的建立有巨大帮助作用。近年来,分子诊断学发展迅速,各种理论和技术层出不穷,而检验医学本科生的分子诊断教学内容更新较慢,且分子诊断实习时间较短,导致教学效果差。该文根据科室的经验,把以问题为导向的学习(PBL)教学法引入检验医学本科生分子诊断实习教学中。首先精心设计不同难度PBL案例,然后通过案例背景知识点的提前预热及PBL案例的分组讨论丰富学生的理论知识,并在实验室操作PBL案例中的分子生物学技术以提升学生的操作技术水平,最后鼓励学生结合实习经历去设计新的PBL案例,激发学生探索临床分子诊断技术的兴趣,从而为后续工作打下坚实的基础。

摘要： 分子生物学诊断技术包括检测DNA、RNA或蛋白质等物质、对疾病进行诊断或辅助诊断、分析基因或蛋白的存在、变异或表达 为疾病提供更直接的证据，常见分子诊断技术、核酸检测核酸扩增技术、测序技术、核酸杂交技术、基因芯片技术、生物传感技术等。

摘要： 结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是最常见的消化系统恶性肿瘤,在我国恶性肿瘤发病率中居第三位,占据恶性肿瘤死亡率的第五位.近年来,结直肠癌发病率逐年上升,而且出现年轻化趋势.因此,通过早期诊断和积极预防等综合措施,对于降低结直肠癌的发生率和死亡率尤为重要.随着新一代测序、基因表达谱、表观基因组以及蛋白质组学的发展,人们对结直肠癌在分子水平的认识逐步深入.通过分子诊断技术对肿瘤分子生物学行为进行研究,从而为患者制定个体化治疗方案可以显著提高CRC的预后.因此,完善的分子诊断技术则是实现个体化治疗的基础和前提.目前分子诊断技术已被广泛应用于CRC风险评估、早期诊断、个体化治疗及预测预后等各个方面,并取得显著成果.

摘要： 出生缺陷是指婴儿出生前发生的身体结构、功能或代谢异常可由染色体畸变、基因突变等遗传因素或环境因素引起,也可由这两种因素交互作用或其他不明原因所致通常包括先天畸形、染色体异常、遗传代谢性疾病、功能异常如盲、聋和智力障碍等.一大类临床和遗传异质性较强的骨骼系统疾病，主要的临床表现包括骨骼畸形、矮小、不成比例生长以及单个或一组骨骼发育不良等，以四肢、躯干和头颅的大小、形状异常为主要特征。

摘要： 介绍了国内政策环境及检验医学市场、公立医院检验科的机遇与挑战、武汉大学人民检验科亚学科发展体会等内容。

摘要： 介绍了人类基因组计划等大规模国际合作研究、测序费用下降、数据生成增长、心血管精准医学意义重大。我国心血管疾病总患病人数高达2.7亿，心血管疾病高居疾病死亡构成的首位,占我国疾病总死亡的43.5％。超过4000万人患有因基因突变所致的心血管疾病.每年有超过50万人因心血管疾病而导致猝死.主要分析了分子诊断和氯吡格雷个体化用药的研究。

摘要： 近年来,液体活检的概念受到了肿瘤界的广泛关注.相比于传统的组织活检,液体活检的主要优势是创伤较小,患者容易接受,因此非常方便进行实时动态的监测.而且在液体状态下,各种肿瘤来源的成分会相对均一,更容易从整体的角度反映肿瘤在时间以及空间上的异质性.目前,液体活检的临床应用前景包括:癌症的早期筛查;制定个体化治疗方案;实时监测疗效和耐药;判断转移风险;指导研发新的靶向药物;认识和了解肿瘤的异质性等.重点针对外周血中的这些循环标志物，对其临床应用进展进行综述。分子诊断对肿瘤的个体化精准治疗具有重大的意义。

摘要： 流式荧光技术是美国Luminex公司的xMAP技术，又称液态芯片、悬浮阵列等，是继基因芯片、蛋白芯片等固态芯片之后的新一代高通量分子诊断技术平台，最突出优势在于高效率的联合检测、既能检测蛋白也能检测核酸、样本需求量极少、可定性或定量分析.

摘要： 犬急性淋巴白血病在临床中发病率较低,但生存时间短,死亡率高.急性白血病临床症状不典型,但外周血出现大量肿瘤化的白细胞是其特征表现,需要通过骨髓穿刺和分子诊断进行确诊.本文介绍一例呈非典型经过的淋巴白血病病例,该犬由于呼吸道症状前来就诊发现严重的泛细胞减少症,在治疗3个月时外周血突然出现大量肿瘤化的白细胞,最终结合骨髓穿刺、分子克隆和临床症状确诊为急性淋巴白血病,于初诊97天时死亡.该病例为一例不典型急性白血病病例,但对白血病的发展过程有一定的提示作用,避免临床医生出现漏诊和误诊.犬淋巴白血病是一种起源于骨髓淋巴细胞的恶性肿瘤疾病,由于T型淋巴细胞、B型淋巴细胞或自然杀伤细胞发生了肿瘤化无限扩增.根据淋巴细胞的成熟阶段,淋巴白血病分为急性淋巴白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)和慢性淋巴白血病(Chronic Lymphoblastic Leukemia,CLL).淋巴白血病的诊断通过体格检查,血常规检查,骨髓穿刺,分子克隆或免疫分型综合诊断.临床大多数病例通过外周血液中出现大量淋巴细胞可做出初步诊断,进一步需要骨髓穿刺和分子学方法进行确诊和分型.本文介绍一例通过骨髓穿刺和PARR方法确诊的急性淋巴白血病病例,但临床表现及实验室检查不典型,可能为急性白血病前期,也可能为慢性白血病的急性转化,因此该病例可为犬急性白血病的发病特点及机理提供参考.

摘要： 恶性肿瘤是严重危害我国人民健康的重大疾病,个性化小分子抗肿瘤药物在一定程度上提高了疗效.结合我国肿瘤诊治的需要,选择多个已有较好前期基础、成药潜力大的小分子靶向抗肿瘤新药或已上市的药物,开展多中心临床研究,明确这些药物的临床应用价值和获益患者的选择标准,同时利用高通量测序、质谱、PCR、杂交等技术平台,伴随个性化药物临床试验同步进行伴随诊断试剂(盒)的研发;研制用于患者筛选、肿瘤分子分型、药物靶标确定及疗效监测和毒副反应相关的系列伴随分子诊断试剂;以临床应用为导向,探索肿瘤伴随分子诊断试剂的临床评价体系,以及个性化药物与伴随诊断产品协同开发的新模式,建立特异靶向治疗生物标志物寻找、确证与临床转化的体系;推动我国医药产业升级,提高我国的肿瘤诊断治疗水平.

摘要： 准确快速的药敏试验结果对于指导临床医师用药具有重要的意义.正确的治疗方案不仅可以极大地缩短治疗时间,减少患者的痛苦和经济负担,而且可以极大地降低结核分枝杆菌发生耐药突变的可能性.1998年,结核分枝杆菌H37Rv株的全基因序列图被破译.结核分枝杆菌耐药相关的基因突变不断被报道.这都促进了分子诊断学方法在结核耐药检测上的应用.此外,随着方法学的进步,耐药结核的分子诊断技术也在向着简便、快速、覆盖位点全面的方向发展.目前,已经转化为商品化试剂盒并在临床推广应用的主要技术有线性探针技术、实时PCR技术和探针熔解曲线分析技术.

摘要： 本发明涉及一种circRNAs分子检测试剂在制备肝癌诊断试剂盒中的应用，具体的说在于提供一种基于hsa_circ_0028185表达检测的肝癌诊断策略和应用。包括用于肝癌诊断的hsa_circ_0028185荧光定量PCR检测试剂盒。本发明检测试剂盒提供一种hsa_circ_0028185测诊断肝细胞肝癌的标准。本发明方法是通过检测血清中hsa_circ_0028185表达变化的情况，预警肝组织的癌变是否发生及肝癌的发生发展情况，为肝癌的确诊及预后、靶向肿瘤代谢的个体化治疗提供必要的依据。

摘要： 本发明提供一种高分子材料的劣化诊断方法及高分子材料的劣化诊断装置，本发明的高分子材料的劣化诊断方法，进行用于电气设备的高分子材料的劣化诊断，对诊断对象的所述高分子材料照射1GHz～50GHz内的任意的频率的电波，由基于所照射的电波的来自所述高分子材料的出射波测定复介电常数，并根据所述介电常数的至少实数部的值进行所述高分子材料的劣化诊断。藉此，可容易且适当地进行诊断对象的高分子材料的劣化诊断。

摘要： 本发明涉及嵌合蛋白、以及其用途和生产方法，所述嵌合蛋白包括用于诊断内脏利什曼病的天然婴儿利什曼原虫的蛋白级分。本发明还涉及核酸、表达盒、表达载体、宿主细胞、用于诊断内脏利什曼病的组合物、用于诊断内脏利什曼病的试剂盒、诊断内脏利什曼病的方法和疫苗组合物。

摘要： 所提出的是用于现场分子诊断的一体化套件和使用其的分子诊断方法。用于现场分子诊断的一体化套件包括第一组件和第二组件，所述第一组件包括样品预处理部分、核酸吸收部分和核酸扩增部分，所述第二组件包括检测部分。样品预处理部分包括被配置为转移其中溶解有核酸的裂解缓冲液的转移构件，并被配置为对样品进行预处理。核酸吸收部定位于样品预处理部分上，并被配置为可滑动至核酸扩增部分上。核酸扩增部分连接至样品预处理部分，并被配置为从核酸吸收部分洗脱核酸并对所洗脱的核酸进行扩增。检测部分被配置为转移由核酸扩增部分扩增的核酸并对核酸进行检测。根据本公开的用于现场分子诊断的一体化套件和使用其的分子诊断方法的优点在于，该套件使普通人能够进行分子诊断而无需专门的装置(例如离心机或移液器)，确保低污染操作，并具有成本效益。

摘要： 本发明公开了一种全自动分子诊断系统及诊断方法，诊断系统包括：至少一个核酸提取试剂条；至少一个用于对加注样本后的核酸提取试剂条进行核酸提取的核酸提取模块；至少一个用于接收核酸提取模块提取的核酸的核酸扩增试剂条；以及至少一个用于对加注核酸后的核酸扩增试剂条进行扩增、读数的扩增读数模块。本发明的全自动分子诊断系统及诊断方法，通过单样本连续串行处理的工作方式来进行分子诊断，即可批量处理样本，也可处理零星的单个样本，还可以随时追加新的样本进行实验，能更灵活的满足客户的多种需求，减少操作人员的工作强度。

摘要： 本发明涉及微流控芯片分子诊断领域，特别涉及分子诊断微流控芯片和分子诊断微流控芯片体系以及它们的应用。芯片包括：接收待检样本的进样单元(1)、储存反应试剂的储液单元(2)、对细胞进行裂解的细胞裂解单元(3)、对核酸进行扩增的核酸扩增单元(4)；细胞裂解单元包括狭缝(31)、由狭缝隔开的第一腔室(32)和第二腔室(33)，至少一个腔室配置有研磨微珠；第一腔室与进样单元相通，第二腔室与至少一个储液单元相通，接收细胞裂解液。芯片体系由上中下三层组成；中层为所述芯片；上下层用于覆盖封闭中层；上层有与进样单元连接的进样孔，对应储液单元的让位孔。该芯片检测过程简单，可对反应样本进行定量，灵敏度高、重复性强。

摘要： 本申请提供了一种分子诊断设备及用于分子诊断设备的离心组件，涉及分子检测技术领域。在离心组件中，卡托承载检测卡，卡托的卡托主体绕转轴转动对检测卡进行离心，检测卡设置有加样腔及检测腔，卡托主体设置多个凹陷部，多个凹陷部围设在转轴周围，每一个凹陷部向远离转轴的一侧即向卡托主体的边缘延伸设置，每一个凹陷部放置检测卡，使检测腔在卡托主体的边缘处位于卡托主体外以配合检测，每一个凹陷部内设置有贯穿卡托主体的容置孔，以使加样腔置于容置孔内配合加热，压紧件用于盖设在卡托主体设置凹陷部的一侧固定检测卡。本申请中的离心组件使得检测卡检测、运输过程操作简单，而且此离心组件可用于检测卡运输、离心处理、加热检测等流程。

摘要： 本申请提供了一种分子诊断设备及用于分子诊断设备的检测卡输送座，涉及分子检测技术领域。在检测卡输送座中，抵压盘设置有第一滑轨组件，托运组件用于放置检测卡，滑动架在滑动方向上与抵压盘之间具有抵接作用力，以与抵压盘一同在滑动方向上滑动；卡托与滑动架连接，卡托用于放置检测卡，检测卡在滑动方向上位于抵压盘远离滑动架的一侧，抵压盘在滑动架受力克服抵接作用力时向检测卡一侧移动并可移动至与检测卡抵接的位置。本申请中抵压盘带动托运组件运动以完成检测卡的运输。托运组件在抵压盘的带动下将检测卡输送至检测卡检测座上，可在托运组件与检测卡检测座抵接时，可减小抵压盘继续运动使得托运组件与检测卡检测做之间相互作用的影响。

摘要： 本申请提供了一种分子诊断设备及用于分子诊断设备的检测卡检测座，涉及分子检测技术领域。在检测卡检测座中，光源用于发出激发光；第一透镜模组用于接收并透过激发光；功能膜片组用于对透过第一透镜模组的激发光进行接收并透过；激发光纤用于对透过功能膜片组的激发光进行传输，用于对检测卡照射激发光；接收光纤用于接收由激发光照射检测卡生成的荧光；第二透镜模组用于接收接收光纤传输来的荧光；传感器用于对透过第二透镜模组的荧光进行接收。本申请利用第一透镜模组及功能膜片组对激发光进行处理，利用第二透镜模组对荧光进行处理，整体结构另涉及到光源和光传感器，所以整体结构较为简单，适合在分子诊断设备中使用。

摘要： 本实用新型涉及微流控芯片分子诊断领域，特别涉及分子诊断微流控芯片和分子诊断微流控芯片体系。芯片包括：接收待检样本的进样单元(1)、储存反应试剂的储液单元(2)、对细胞进行裂解的细胞裂解单元(3)、对核酸进行扩增的核酸扩增单元(4)；细胞裂解单元包括狭缝(31)、由狭缝隔开的第一腔室(32)和第二腔室(33)，至少一个腔室配置有研磨微珠；第一腔室与进样单元相通，第二腔室与至少一个储液单元相通，接收细胞裂解液。芯片体系由上中下三层组成；中层为所述芯片；上下层用于覆盖封闭中层；上层有与进样单元连接的进样孔，对应储液单元的让位孔。该芯片检测过程简单，可对反应样本进行定量，灵敏度高、重复性强。