重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3号

摘要

目的：建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus3,GLRaV-3). 方法：根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP70基因(Heat shock protein70)保守序列,设计用于RPA检测的特异性引物,建立GLRaV-3的RPA检测方法,并对其特异性和灵敏度进行验证. 结果：建立的RPA检测方法能够从GLRaV-3带毒株中检测到约380bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40min,无需特殊的仪器设备,经特异性评价特异性好,且该方法与普通PCR检测灵敏度基本一致. 结论：本研究建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合GLRaV-3的快速检测.