日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的免疫学特异性分析

摘要

[目的]分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持.[方法]用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡聚糖凝胶层析和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),对日本血吸虫可溶性虫卵抗原进行了分离、鉴定.[结果]SDS-PAGE分离出10条蛋白条带,依次为100、80、60、55、45、28、27、17、15和13 KDa的小分子量蛋白;采用阳性病牛血清进行Western-blot,共鉴定出有3条特异带,分子量分别为50、28、17 KDa,28和17KDa条带较为明显,而50KDa条带较弱;葡聚糖凝胶层析分离出2个蛋白质高峰,即大分子量蛋白组分峰(I峰)和小分子量蛋白组分峰(Ⅱ峰);再经Dot-ELISA鉴定表明,Ⅱ峰中高速离心后的上清蛋白是可用于牛血吸虫病诊断的特异性抗原.[结论]葡聚糖凝胶层析分离出的Ⅱ峰蛋白再经过高速离心后,其上清蛋白是能够用于牛日本血吸虫病诊断的特异性天然蛋白.