粉防己碱(Tet)对MDCK细胞钙激活钾通道(KCa)的影响

摘要

目的MDCK细胞钙激活钾通道(KCa)的鉴定及探讨Tet对该通道的影响.方法内面向外式(inside-out)膜片钳技术.结果 (1)在对称性高钾溶液([K+].:[K+]i=140mmolL1/140mmolL-1)中,主要记录到电导为50.475±0.600pS(n=5)的外向通道电流,随电压增加而增加.(2)浴液中钾离子浓度由140mmolL-1改变为45mmolL-1,在0mV记录到内向电流,从+30mv开始记录到记录到外向电流,电导为50.275±0.294pS(n=5).(3)在对称性高钾溶液、膜电位+60mV时.向浴液中加入不同浓度的Ca2+,从10-7molL-1开始,通道活动浓度依赖性增加.(4)对称性高钾溶液、膜电位为+60mV,向浴液中加入Tet,通道活动在1.5×10-5molL-1时最大,在6.0×10-5molL-1时明显受到抑制,几乎为0,洗脱后,部分恢复.结论(1)在MDCK细胞上记录到中电导钙激活钾通道(IKCa),该通道具有电压依赖性和胞内游离Ca2+浓度依赖性,无整流特性.(2)Tet在7.5×10-6molL-1时对MDCK细胞Ka没有显著影响;在1.5×10-5molL-1促进KCa开放,增加钾离子外流;在6.0×10-5molL-1时抑制MDCK细胞Kca开放,减少钾离子外流.