一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药基因的研究

摘要

提取一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药菌株E·coliBJ 9614 7的质粒DNA进行转化,转化子能稳定表达其全部抗生素抗性,表明E·coliBJ 96147对卡那霉素(K)、庆大霉素(G M)、链霉素(S)、氯霉素(C)、四环素(Tc)、复方新诺明等六种抗生素的抗性由耐药性R质粒介导;根据已发表的编码卡那霉素抗性的磷酸转移酶[APH(3′)-Ⅱ]钝化酶基因的核苷酸序列,设计合成了一对引物P1和P2,用PVR技术检测其钝化酶基因,结果该引物扩增出了预期的578 bp大小的PCR产物,进一步用限制性内切酶Hind Ⅲ进行酶切分析,发现产物被切成二条带,与预期出现的389 bp及189 bp二条带相符,说明PCR可用于检测猪源大肠埃希氏菌卡那霉素磷酸转移酶[APH(3′-Ⅱ)]钝化酶基因.