miR-363-5p抑制BRD4表达对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨miR-363-5p对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及可能的分子机制.方法 通过qRT-PCR技术检测人正常鼻咽上皮细胞NP-69和4株不同鼻咽癌细胞(5-8F、CNE1、CNE2Z和C666-1)中的miR-363-5p.将miR-363-5p mimics转染至5-8F细胞,qRT-PCR检测转染效果,MTT实验检测过表达miR-363-5p对5-8F细胞增殖的影响,流式细胞术检测过表达miR-363-5p对5-8F细胞凋亡的影响,Western blotting法检测细胞中的Bax和Cleaved Caspase-3蛋白,生物信息学工具预测miR-363-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验和Western blotting法验证miR-363-5p与BRD4基因靶向调控关系.结果 与NP-69细胞相比,miR-363-5p在5-8F、CNE1、CNE2Z和C666-1细胞中表达降低(P均<0.05),在5-8F细胞中表达最低.在5-8F细胞中转染miR-363-5p mimics能够上调miR-363-5p的表达(P<0.05),过表达miR-363-5p后5-8F细胞增殖能力减弱(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05),Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达上调(P<0.05).生物信息学软件预测结果显示,BRD4是miR-363-5p的直接靶基因;双荧光素酶报告基因实验和Western blotting检测结果显示,miR-363-5p能够靶向调控BRD4的表达.结论 miR-363-5p可能通过靶向调控BRD4抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,诱导细胞凋亡.