破骨细胞因子对体外培养胎鼠DRG内疼痛相关蛋白表达的影响

摘要

cqvip:目的探讨破骨细胞因子对体外培养胎鼠背根神经节(DRG)内疼痛相关蛋白表达的影响。方法将20只孕鼠饲养至孕15d进行手术取胚胎,取胎鼠DRG进行体外培养。原代培养DRG至第48h,随机分为6组,对照组(含0.1%PBS)、转化生长因子β1(TGF-β1)处理组(含10ng/mL的TGF-β1)、胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)处理组(含1μg/mLIGF-Ⅱ)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)处理组(含10ng/mL的bFGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)AA处理组(含50ng/mL的PDGF-AA)、骨形态发生蛋白5(BMP-5)处理组(含10μg/mL的BMP-5),分别加入含破骨细胞因子的培养液,作用24h后,分别采用Western blotting实验与实时荧光定量PCR技术检测促生激素长神经肽(Gal)、Gal受体1(GalR1)、Gal受体2(GalR2)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白及mRNA表达。结果与对照组比较,各处理组Gal、SP、CGRP蛋白相对表达量高(P均<0.05),TGF-β1处理组、PDGF-AA处理组GalR1蛋白相对表达量低(P均<0.05),TGF-β1处理组、bFGF处理组、PDGF-AA处理组GalR2蛋白相对表达量高(P均<0.05)。与对照组比较,各处理组Gal、CGRPmRNA相对表达量高(P均<0.05),TGF-β1处理组、PDGF-AA处理组GalR1mRNA相对表达量低(P均<0.05),TGF-β1处理组、bFGF处理组、PDGF-AA处理组GalR2mRNA相对表达量高(P均<0.05),TGF-β1处理组、IGF-Ⅱ处理组、bFGF处理组、PDGF-AA处理组SPmRNA相对表达量高(P均<0.05)。结论破坏骨细胞因子TGF-β1、IGF-Ⅱ、bFGF、PDGF-AA、BMP-5对体外培养DRG内疼痛相关蛋白Gal、GalR1、GalR2、SP、CGRP的表达有一定影响。