等位基因特异性PCR技术在5-脂氧合酶基因多态性检测中的应用

摘要

目的 探讨等位基因特异性PCR技术检测5-脂氧合酶基因六个位点的单核苷酸多态性(SNP)的效果.方法 采集36例哮喘患者外周静脉血2 mL,用0.2％氯化钠处理收集白细胞,采用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(AS-PCR)法直接对已知位点的SNP进行扩增分型.针对野生型和突变型设计3 ′端的碱基,且倒数第二位的碱基设计故意错配的碱基,用以提高引物的特异性.结果 5-脂氧合酶六个位点的SNP检测结果准确清晰.结论 采用本研究设计的引物可以对5-脂氧合酶的六个位点直接扩增分型；与测序法和限制性内切酶酶切法相比,等位基因特异性PCR技术检测5-脂氧合酶六个位点的SNP具有经济、快速、简便、易行等特点.