氧化苦参碱对miR-122低表达、感染HBV肝细胞的抗病毒作用观察

摘要

目的 观察氧化苦参碱(OMT)对miR-122低表达、感染HBV肝细胞的抗病毒作用.方法 体外培养HepG2.2.15细胞,分为A、B、C、D、E、F组.细胞接种培养板24 h后将A、B、C组更换为无血清DMEM培养基,D、E、F组更换为配制好的含4 mg/mL OMT的无血清DMEM培养基.同时A、D组加入Lipofectamine2000;B、E组加入Lipofectamine2000和miR-122抑制剂hsa-miR-122-5p inhibitor;C、F组加入Lipofectamine2000和miR-122抑制剂阴性对照inhibitor Negative Control#22.48 h后收集各组细胞,采用荧光定量PCR法检测miR-122.于转染后48 h收集各组培养液上清和细胞,采用电化学发光法检测培养液上清中的HBsAg和HBeAg,采用荧光定量PCR法检测细胞中的HBVDNA.结果 A、B、C、D、E、F组miR-122相对表达量分别为1.00±0.26、0.72±0.15、1.04±0.28、3.09±0.94、1.27±0.59、3.00±0.62.B组miR-122相对表达量小于A、C组(P均<0.05);E组miR-122相对表达量小于D、F组(P均<0.05).E组培养液上清中HBsAg、HBeAg水平及细胞中HBV DNA表达低于B组,高于D组和F组(P均<0.05).D组培养液上清中HBsAg、HBeAg水平及细胞中HBV DNA表达低于A组(P均<0.05),F组培养液上清中HBsAg、HBeAg水平及细胞中HBVDNA表达低于C组(P均<0.05).结论 OMT对miR-122表达下调HepG2.2.15细胞的抗HBV作用受到抑制,OMT可能通过调节miR-122的表达对HBV复制起抑制作用.