SET8基因下调对大鼠血管平滑肌细胞增殖迁移的影响及其机制

摘要

目的 探讨赖氨酸甲基转移酶SET8基因下调对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移的影响及其机制.方法 SD大鼠6只,体外分离培养大鼠VSMCs.将VSMCs随机分为正常对照组、空质粒组、SET8-shRNA组,正常对照组为正常VSMCs,空质粒组转染2μg/L NS-shRNA,SET8-shRNA组转染2μg/L SET8-shRNA.应用MTT实验检测各组VSMCs转染后第0、12、24、36、48 h增殖能力,Transwell实验检测迁移能力,Western blotting法检测SET8蛋白,实时荧光定量PCR法检测SET8、金属基质蛋白酶(MMP)2、MMP9、E钙黏附蛋白(E-Cadherin)mRNA.结果 与正常对照组和空质粒组相比,SET8-shRNA组SET8 mRNA及蛋白表达低,转染后第0、12、24、36、48 h细胞增殖OD值小,迁移细胞数少,MMP2、MMP9 mRNA表达低,E-Cadherin mRNA表达高(P均<0.05).结论SET8基因下调后,大鼠VSMCs的增殖与迁移能力降低;这可能与下调MMP2、MMP9表达,上调E-Cadherin表达有关.