促红细胞生成素对高糖诱导大鼠近端肾小管上皮细胞转分化的影响

摘要

目的:研究促红细胞生成素(EPO)对高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化(EMT)的影响及其分子机制。方法:在25 mmol/L浓度葡萄糖培养基中培养NRK52E,建立高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT模型。实验分为正常对照组(NC组)、甘露醇对照组(OC组)、高葡萄糖浓度组(HG组)、HG+EPO 50 U/ml组(E1组)以及HG+EPO 100 U/ml组(E2组)。其中NC组培养在正常环境中,OC组培养在19.5 mmol/L甘露醇环境中,其余三组培养在高糖环境中,且E1、E2组按要求添加相应浓度的EPO。RT-PCR检测促红素受体(EPOR)、E钙粘蛋白(E-cadherin)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA的表达,Western blot检测EPOR、E-cadherin及α-SMA蛋白表达;荧光探针检测胞内活性氧(ROS)水平。结果:高糖培养成功诱导NRK52E细胞EMT模型,相较于NC组,HG组细胞EPOR、α-SMA表达增加,E-cadherin表达降低,细胞ROS水平显著增加(均P<0.05);EPO干预抑制NRK52E细胞EMT,与HG组比较,E1和E2组E-cadherin表达增加,α-SMA表达降低,细胞内ROS水平降低,且E2组变化更显著。结论:EPO可能通过EPO受体的介导,缓解高糖诱导的氧化应激,抑制高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞表型转化。