大黄酸抑制高糖和血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞肥大

摘要

目的:探讨大黄酸(Rhein)对高糖和血管紧张素Ⅱ(angiotensin，Ang Ⅱ)诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞肥大的影响及其影响途径。 方法:实验用SD大鼠。麻醉下，无菌分离单根近球小管并培养，以免疫细胞化学方法鉴定体外培养的肾小管上皮细胞。MTT比色法检测体外培养的肾小管上皮细胞的增殖情况。在高糖(30mM)环境下用血管紧张素Ⅱ(10<'-7>M)刺激肾小管上皮细胞肥大。与此同时，加入不同浓度的大黄酸(30mg/L，15mg/L，5mg/L)，作用24～72小时后检测细胞体积，<'3>H-亮氨酸掺入量以及蛋白质含量以观察细胞肥大的变化。 结果:MTT比色法检测体外培养的肾小管上皮细胞的增殖情况，各实验组OD<,490>值分别与正常对照组比较，在含D-葡萄糖30mmol/L组，细胞培养24h与正常对照组比较出现细胞增殖受抑制(0.318±0.037 VS 0.340±0.035，P<0.05)，48h抑制程度增强(0.304±0.030 YS 0.335±0.036，P<0.01)，72h显著抑制(0.241±0.015 vs 0.317±0.027，P<0.01)。体外培养的肾小管上皮细胞经高糖(30mM)培养72小时导致细胞体积明显增大，表现为流式细胞仪检测前向角散射光的强度明显右移(122.84±2.93 VS 116.80±2.94，P<0.01)，<'3>H-亮氨酸掺入量(16905±1271.3 cpm/10<'5>cells VS7308.5±961.1cpm/10<'5>cells，P<0.01)及细胞内蛋白质含量(5.13±0.20μg/10<'5>cells VS 3.39±0.19μg/10<'5>cells，P<0.01)明显增加。细胞经高糖(30mM)+Ang Ⅱ(10<'-7>M)培养72小时导致细胞体积(127.59±2.36VS 122.84±2.93，P<0.05)，<'3>H-亮氨酸掺入量(23362±2182.5 cpm/10<'5>cellsVS 16905±1271.3cpm/10<'5>cells,P<0.01)及细胞内蛋白质含量(7.06±0.24μg/10<'5>cells vS 5.13±0.20μg/10<'5>cells，P<0.01)较高糖(30mM)组增加。加入大黄酸处理72小时后，大黄酸(30mg/L)组较高糖(30mM)+Ang Ⅱ (10<'-7>M)培养组细胞体积减小(118.85±3.67 VS125.87±2.95, P<0.05)， <'3>H-亮氨酸掺入量明显降低(10947±1007.3cpm/10<'5>cells VS 21849±2809.7cpm/10<'5>cells,P<0.01)，细胞内蛋白质含量明显降低(4.38±0．45μg/10<'5>cells vs 7.16±0.20μg/10<'5>cells，P<0.01)。 结论:①高糖培养抑制肾小管上皮细胞增殖。 ②高糖培养诱导肾小管上皮细胞肥大。 ③血管紧张素Ⅱ增强高糖诱导的肾小管上皮细胞肥大作用。 ④大黄酸抑制高糖和血管紧张素Ⅱ诱导的肾小管上皮细胞肥大。

目录

论文说明：英文缩略词简表

摘要

引言

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 脑内血管紧张素Ⅱ及其体液平衡

致谢