目的:研究在纳米细菌诱导实验性大鼠肾结石形成过程中,大鼠肠道草酸降解菌的改变及其与肾结石形成的关系。方法:30只4周龄Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后,按照随机数表法分为三组,对照组(NC组):1.2 ml 0.9%氯化钠溶液尾静脉注射+2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃;干扰组(NBT组):1.2 ml纳米细菌悬液尾静脉注射+2 ml四环素溶液灌胃;纳米细菌组(NB组):1.2 ml纳米细菌悬液尾静脉注射+2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃。标准饲养8周后处死,取双侧肾脏组织行HE、Pizzolatto’s染色,称取1 g回盲部新鲜粪便并提取DNA,使用qPCR法检测产甲酸草酸杆菌(Oxc)、乳杆菌属细菌(Lac)、双歧杆菌属细菌(Bif)和肠杆菌科细菌(Ent)四种主要肠道草酸降解细菌的基因表达量,留取腹主动脉血液及肾脏组织,流式细胞仪检测淋巴细胞分化情况,WB检测骨桥蛋白(OPN)及Tamm-Horsfall蛋白(THP)两种炎性蛋白在肾脏组织中的表达情况。结果:NC组肾小管管腔内未见明显晶体及炎症细胞浸润,NBT组部分肾小管扩张,肾小管管腔内可见不规则晶体及炎症细胞浸润,NB组肾小管明显扩张,肾小管管腔内可见大量不规则晶体,部分连接成片,可见大量炎症细胞浸润;三组大鼠粪便中均检测到四种肠道草酸降解菌,且各肠道草酸降解菌在三组大鼠盲肠中的占比相似,均为Oxc最高,约占半数,Lac、Ent次之,Bif最少,仅占约1%,三组大鼠粪便中各肠道草酸降解菌占比无统计学差异(均P>0.05),但三组粪便中肠道草酸降解菌的总量有统计学差异,NC组最高、NB组次之、NBT组最低,NC组与其余两组间的差异均有统计学意义(均P<0.01);流式细胞筛选结果提示三组大鼠血液淋巴细胞出现不同程度分化,Pearson相关性分析结果提示OPN与THP联系紧密,增长趋势具有一致性并且THP蛋白与CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞也具有强相关性。结论:纳米细菌诱导肾结石形成过程中肠道草酸降解菌总量降低,但各肠道草酸降解菌所占比例无明显改变。
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