Claudin-14在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究

摘要

目的 本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用.方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳米细菌组,每组30只.正常对照组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射0.9％氯化钠注射液1.2 mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射等量的纳米细菌悬浊液.两组Wistar雄性大鼠注射后的10周内每周处死3只.每周采用病理组织学方法评估每组3只Wistar雄性大鼠成石情况,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化方法连续10周检测紧密连接蛋白-14(Claudin-14)mRNA和蛋白的表达.结果 ①病理组织学检查结果:第4周以后纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾小管内发现晶体颗粒,且主要分布于近、远曲小管,1～10周对照组Wistar雄性大鼠未见晶颗粒.②实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组化结果:3周内Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中几乎未见表达,从第4周起Claudin14mRNA和蛋白在纳米细菌组中表达水平增高并且对照组明显增高,1～10周间Claudin-14mRNA和蛋白在对照组中几乎未见表达.结论 Claudin-14表达的增加可能在纳米细菌形成结石中起重要作用.