鸡传染性支气管炎病毒腺胃分离株的分子鉴定

摘要

从发病鸡场中收集的腺胃肿大病料(编号为2/97、3/97和1/98),经匀浆和无菌处理后在SPF鸡胚中传代、分离和鉴定.结果显示,接种病料培养的鸡胚可干扰新城疫病毒的复制;这些分离毒株可与阳性标准参考株IBV抗血清反应,但表现出较低的中和反应能力.在理化和血凝特性等鉴定的基础上,参照已发表的IBV Beaudette毒株S1基因序列,设计并合成1对含有EcoR I和BamH I 酶切位点的特异性引物,利用RT-PCR技术扩增到分离毒株3/97、2/97、1/98 长度为1.93 kb 的cDNA片段,并将其cDNA片段插入到克隆载体pBlueScript-SK(+)中,进行核苷酸序列的测定,确证所扩增和克隆的cDNA 片段由1 930个碱基组成,并编码1条由620个氨基酸组成的多肽.与GenBank中其它IBV S1 基因序列进行比较,发现3/97、2/97和1/98毒株与所比较的IBV毒株核苷酸的一致性为73.6%～99.7%,氨基酸的一致性为78.4%～99.7%.