降解菌DDS-1产3-AC-DON氧化酶的酶学特性

摘要

[目的]研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,D0N)降解菌Devosia sp.DDS-1产生的3-AC-D0N氧化酶的酶学特性,掌握DDS-1降解3-AC-D0N到3-酮基-D0N特性,为该酶的开发应用奠定理论基础.[方法]LG培养基培养D0N毒素降解菌Devosia sp.DDS-1后,用PBS离心洗涤菌体后采用超声波破碎,用硫酸铵沉淀菌体破碎液获得粗酶液;然后在不同的酶反应体系中检测3-AC-D0N氧化酶的酶活性. [结果]降解菌DDS-1产生3-AC-D0N氧化酶的最适条件为:pH7.0、25℃、培养36 h;该酶酶反应的最适温度为35℃,最适反应pH为7.0;该酶在20-40℃,pH 5.0-9.0的范围内能保持80％以上的酶活性;大多数金属离子在浓度为0.2-2 mmo1 ·L-1对3-AC-D0N氧化酶有促进作用;乙二胺四乙酸(EDTA)对该酶活性有抑制作用;酶的定域试验结果显示该酶为胞内酶;DDS-1产生的粗酶液能很好地降解小麦中的D0N、3-AC-D0N毒素.[结论]Devosia sp.DDS-1产生的3-AC-D0N氧化酶的酶学特性研究表明,DDS-1产生的3-AC-D0N氧化酶具有较好的温度和酸碱稳定性,该酶反应需要金属离子作为辅因子.