铁皮石斛糖蛋白对皮肤炎症期的调控作用及机制

摘要

研究铁皮石斛糖蛋白(DOKMG)对皮肤炎症期的调控作用及机制.本文以巨噬细胞株RAW264.7为研究对象,用铁皮石斛糖蛋白刺激巨噬细胞并做时间和浓度依赖性分析,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测炎症因子白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及炎症相关的环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)和一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA表达水平.应用酶联免疫吸附反应(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞培养上清中炎症因子的表达.采用蛋白印迹(Western blot,WB)分析铁皮石斛糖蛋白对炎症因子蛋白水平表达及核转录因子-κB(Nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的影响.结果 显示,铁皮石斛糖蛋白能在24h后极显著促进IL-1,IL-6,TNF-α的基因表达(P＜0.001),当浓度达到100 μg/mL时促进最为明显,IL-1β相比对照组增加了10.09倍,IL-6增加了20.45倍,TNF-α增加了0.95倍.DOKMG对细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-1β有促进作用,且成剂量依赖性,当浓度为100 μg/mL时,两者分泌量分别由0.52 μg/mL、118.52 pg/mL上升至1.99 μg/mL、272.81 pg/mL.DOKMG能显著促进炎症因子蛋白的表达及NF-κB信号通路相关蛋白的磷酸化(P＜0.05).上述结果表明,铁皮石斛糖蛋白通过调节细胞炎症反应来促进伤口愈合,其部分机制与NF-κB信号通路激活有关.