木瓜蛋白酶中具有壳聚糖水解酶活性成分的分离

摘要

应用超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析三种方法,对木瓜蛋白酶进行了分离纯化,在CM-Sephadex-C-50的洗脱图谱上得到三个明显蛋白质吸收峰(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),对洗脱液进行蛋白酶活力和壳聚糖酶活力测定表明,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ峰均有蛋白酶活性,同时出现两个壳聚糖酶活峰(A、B),其中峰A与峰Ⅱ重叠,而峰Ⅰ、Ⅲ处未检测出明显壳聚糖酶活.壳聚糖酶活峰A处有溶菌酶活力,而峰B处未检测到.对壳聚糖酶活峰A进一步凝胶过滤层析,发现只有一个蛋白峰,其中蛋白酶活与壳聚糖酶活峰基本重叠,且具有较高溶菌酶活力.