高温紫链霉菌酸性耐热几丁质酶的纯化及性质研究

摘要

从高温紫链霉菌Z16发酵液中分离纯化得到一种酸性耐热几丁质酶,并对其酶学性质进行了研究。粗酶液经硫酸铵沉淀和离子交换层析纯化后得到电泳级纯酶,酶活力回收率为22.3%,纯化倍数为12.7倍,比活力由2.9U/mg提高到36.8U/mg。SDS-PAGE和凝胶过滤测定纯酶的分子量分别为41.6ku和40.8ku,表明该酶为单亚基蛋白。酶学性质测定结果表明,该几丁质酶为酸性酶,最适pH为4.0,在pH3.0～6.0时保持较高的酶活力。该几丁质酶的最适反应温度为60℃,且具有较好的温度稳定性,在55℃和60℃时的半衰期分别为267min和132.9min。该几丁质酶能够水解胶体几丁质,水解产物主要为N-乙酰氨基葡萄糖和几丁二糖以及少量的几丁三糖。该酶优良的酶学特性使其具有广阔的工业应用前景。