酸奶中长双歧杆菌PCR计数方法的建立

摘要

根据细菌保守序列设计一对通用引物,扩增细菌16S rDNA序列,作为阳性标记;根据长双歧杆菌菌株的16S rRNA和23S rRNA之间的间区基因序列设计定性PCR引物。用BBL琼脂平板对长双歧杆菌混合发酵的酸奶进行培养计数,随机挑选部分长出的菌落,提取DNA做PCR鉴定。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。抽提方法操作简便、高效、灵敏,决定着PCR计数方法的准确高效,本研究着重研究了菌体DNA抽提方法的影响因素,以及抽提方法通用性,同时也研究了PCR引物的特异性。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。