响应面法优化酶解制备核桃多肽工艺

摘要

以高蛋白核桃粉为原料,采用酶解法制备核桃多肽。在单因素实验基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以多肽质量浓度和水解度为响应值,研究p H、温度、加酶量和时间对其影响,在此基础上将酶解液通过超滤系统分离得到不同分子量多肽,并测定不同分子量多肽的抗氧化活性。结果表明:料液比1∶20 g/m L磨浆时蛋白质溶出较充分,碱性和木瓜蛋白酶按1∶1复配,风味蛋白酶添加量2000 U/g辅助酶解时水解效果较好,酶解法提取核桃多肽最优工艺:p H 7.10,温度50℃,加酶量8000 U/g,时间3.0 h,该条件下多肽质量浓度为10.01 mg/m L,水解度为11.45%,接近理论值。经超滤分离后得到≤5、5~10、10~30和≥30 k Da四种分子量多肽,不同分子量多肽都具有一定的抗氧化活性,并且≤5 k Da多肽的还原力(IC50=5.47 mg/m L)、DPPH·清除能力(IC50=1.03 mg/m L)、·OH清除能力(IC50=5.02 mg/m L)、O-2·清除能力(IC50=0.68 mg/m L)和总抗氧化能力（14.18 U/m L）均高于其它三种多肽。本研究为核桃产品的深加工和开发提供了一定的理论指导。