基于斑马鱼模型探究药食同源复方降尿酸作用及成分分析

摘要

目的:探究芹菜籽、蒲公英、菊苣和玉米须四种药食同源中药联用下的降尿酸活性和作用机制,分析这四种中药复合提取物中具备降尿酸作用的主要效应成分。方法:随机选取5 dpf野生型AB品系斑马鱼,通过250μmol/L氧嗪酸钾和10μmol/L黄嘌呤钠盐诱导建立斑马鱼高尿酸模型,将已建立的斑马鱼模型随机分为对照组、模型组、别嘌醇组(136μg/mL)和复方提取物低、中、高(250、500及1000μg/mL)剂量组,每组30尾,连续干预24 h后,测定斑马鱼体内的尿酸荧光值和次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)、葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)、有机阴离子转运体(OAT1)基因表达水平;采用超高液相色谱-串联高分辨质谱仪为主要手段,以乙腈-甲酸水为流动相,梯度洗脱,ESI离子源正、负离子扫描模式,结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴定。结果:与模型组相比,复方提取物低、中、高剂量组均能极显著降低高尿酸斑马鱼模型的血尿酸水平(P<0.01),且能够有效上调高尿酸斑马鱼体内HPRT1、OAT1的相对表达量、下调GLUT9的相对表达(P<0.05);初步筛选鉴定出黄酮及其苷类、有机酸、香豆素、萜类等22种活性成分,均为复方提取物中具有降尿酸机制的效应物质。结论:复方提取物可能通过上调模型组斑马鱼体内HPRT1、OAT1的表达量、下调GLUT9的表达,发挥多方位降尿酸的作用;所筛选鉴定的化学成分为下一步筛选作用靶点提供参考。