RNAi特异性抑制FoxO3a对胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡的影响

摘要

观察FoxO3a基因干扰对胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡的影响.分离培养大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs),建立模拟缺血再灌注模型.分别选用胰岛素、FoxO3a小干扰RNA处理细胞.MTT检测CMECs存活率;TUNEL检测CMECs凋亡;检测细胞的caspase-3活性,Western blot法检测FoxO3a、p-FoxO3a(Thr32)、SVV蛋白的表达.结果显示模拟缺血再灌注+胰岛素+ FoxO3a siRNA组FoxO3a总蛋白水平明显减少(P＜0.05);与模拟缺血再灌注+胰岛素组相比,模拟缺血再灌注+胰岛素+ FoxO3a siRNA组的存活率下降,凋亡率、caspase-3活性增加,FoxO3a、SVV表达减少(P＜0.05).结果FoxO3a在胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡中有一定的作用,且主要通过去磷酸化(失活)调控这一过程.