FOXO3a

摘要： 目的:研究姜黄素(curcumin)对人肾透明细胞癌(clear-cell renal cell carcinoma,ccRCC)细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,及叉头框蛋白O3a(Forkhead box protein O3a,FOXO3a)在姜黄素抗肿瘤效应中发挥的关键作用。方法:MTT法用于检测姜黄素对ccRCC细胞活力的抑制作用;Annexin V/PI双染实验检测姜黄素对ccRCC细胞的诱导凋亡作用;免疫印迹法(Western blot,WB)检测姜黄素对FOXO3a、p-FOXO3a及下游BIM表达的影响,和凋亡蛋白caspase 3的激活情况。实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测FOXO3a转录水平。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术用于沉默ccRCC细胞系中FOXO3a的表达。结果:通过对6种ccRCC细胞系(ACHN、786-O、769-P、A-498、Caki-1及Caki-2)FOXO3a蛋白基础表达水平进行检测,选取FOXO3a表达较高的786-O细胞系为研究对象。0~160μmol/L姜黄素处理786-O细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性对细胞活力具有显著抑制作用;786-O细胞在0~80μmol/L姜黄素处理24 h后,明显促进细胞凋亡水平,且伴随着凋亡相关蛋白caspase 3的激活。786-O细胞中,姜黄素抑制p-FOXO3a,促进FOXO3a活化,并上调下游BCL-2家族促凋亡蛋白BIM表达水平。在siRNA沉默FOXO3a蛋白表达后,姜黄素对786-O细胞的生长抑制和诱导凋亡作用被抑制。结论:姜黄素通过诱导激活FOXO3a,在ccRCC细胞上发挥生长抑制和诱导凋亡的抗肿瘤作用。

摘要： 目的分析转录因子FOXO3A在消化道肿瘤中的表达,并分析其在西妥昔单抗耐药中的作用。方法通过TCGA数据库分析FOXO3A在消化道肿瘤中的表达水平及其与疾病无进展生存期和总体生存期的关系。通过对临床西妥昔治疗患者的术后样本进行FOXO3A免疫组织化学染色,分析其表达水平与西妥昔治疗效果的关系。通过构建西妥昔耐药Caco2细胞系(Caco2-CR),分析FOXO3A表达水平。通过在Caco2-CR细胞系中敲减FOXO3A,在Caco2西妥昔敏感细胞系(Caco2-CS)中上调FOXO3A表达,CCK-8(Cell Counting Kit-8)分析其增殖能力及对西妥昔治疗的反应性。结果FOXO3A在食管癌、胃癌及直肠癌中表达高于其对应癌旁组织,在胃癌患者中,高表达FOXO3A患者的总体生存(P=0.044)及疾病无进展生存(P=0.015)较低表达FOXO3A患者差。在西妥昔耐药的结肠癌患者中,肿瘤组织中FOXO3A表达水平较高;而在西妥昔敏感患者中,肿瘤组织FOXO3A表达水平呈中等-低水平。西妥昔单抗不能有效抑制过表达FOXO3A的Caco2-CS细胞系;但在敲减FOXO3A的Caco2-CR细胞中,西妥昔单抗能有效抑制细胞增殖。结论FOXO3A作为转录因子,在结肠癌患者西妥昔单抗耐药中发挥重要作用。

摘要： 目的探讨山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力及Klotho/Akt信号通路的影响。方法采用D-半乳糖腹腔注射法制备Wistar大鼠脑老化模型,然后给予不同剂量山茱萸多糖观察大鼠学习记忆能力、β-半乳糖苷酶活性、Klotho、Akt、FoxO3a、Mn-SOD等指标变化。结果与模型组比较,山茱萸多糖中、高剂量组学习记忆能力提高(P<0.01),Klotho、Mn-SOD、FoxO 3 a mRNA表达升高(P<0.01),Klotho、Mn-SOD蛋白表达升高(P<0.01),而Akt mRNA表达降低(P<0.01)。结论山茱萸多糖可提高脑老化模型大鼠学习记忆能力,其机制与提高海马组织中Klotho通路相关分子表达,激活下游靶分子Mn-FoxO3a和Mn-SOD表达有关,进而改善大鼠的学习记忆能力。

摘要： 目的探讨大补元煎含药血清经FOXO3a介导的磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对卵巢储备功能减退改善的作用及机制。方法取36只健康SD大鼠随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、大补元煎高剂量组(6只)、大补元煎中剂量组(6只)、大补元煎低剂量组(6只)和西药组(6只),均注射环磷酰胺75 mg/kg造模,在进行相应的治疗后,比较各组大鼠的卵巢储备功能。结果HE染色结果显示,与模型组比较,大补元煎高、中、低剂量组和西药组大鼠卵巢组织的卵泡数量、颗粒层厚度、层次数,排列密集程度明显增加,闭锁卵泡数量减少。空白组大鼠的血清雌二醇(E_(2))、抗米勒管激素(AMH)、抑制素B(INH-B)高于其他各组大鼠,促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)低于其他各组大鼠,差异有统计学意义(P0.05)。空白组、大补元煎高剂量组大鼠的FOXO3a表达量低于其他各组大鼠,PI3K、AKT表达量高于其他各组大鼠,差异有统计学意义(P0.05);大补元煎高、中、低剂量组及西药组大鼠的FOXO3a表达量低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论大补元煎可固本培元、大补气血,在调理卵巢功能下降方面有显著疗效,有缓解大鼠卵巢早衰症状的作用,此作用与大补元煎调控体内FOXO3a、PI3K和AKT表达量机制密切相关。

摘要： 目的基于SIRT3/FoxO3a通路探讨三叶苷(TLB)预处理能否减轻下肢缺血再灌注(IR)继发的肺损伤及其具体机制。方法制备下肢IR模型,50只小鼠随机分为5组,即假模型组(Control组)、缺血再灌注组(IR组)、三叶苷组(TLB+IR组)、三叶苷+SIRT3抑制剂组(3-TYP+TLB+IR组)、SIRT3抑制剂组(3-TYP+IR组)。模型建立后,抽取动脉血进行血气分析,观察肺组织病理学改变及凋亡情况,测定氧化应激指标中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量,以及肺组织中沉默信息调节因子3(SIRT3)、叉头框蛋白O3a(FoxO3a)蛋白表达水平。结果与Control组相比,IR组血气指标明显下降,光镜下可见肺泡形态结构破坏并伴大量炎性细胞浸润,肺组织中SOD、GSH-Px活力显著下降、MDA含量和凋亡水平明显增高(P<0.05)。TLB+IR组因三叶苷干预后,可有效改善血气指标,光镜下可见肺泡形态结构相对完整,肺损伤评分相对降低,肺组织氧化应激损伤和凋亡水平相对减轻,SIRT3/FoxO3a信号通路激活(P<0.05)。3-TYP+TLB+IR组应用SIRT3特异性抑制剂(3-TYP)抑制SIRT3信号通路后,三叶苷的保护作用明显减弱(P<0.05)。而3-TYP+TLB+IR组与3-TYP+IR组指标差异无统计学意义。结论三叶苷预处理可减轻氧化应激反应,改善下肢缺血再灌注继发的肺损伤,其机制可能与调节SIRT3/FoxO3a通路有关。

摘要： 目的探讨酮体对脓毒症小鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的保护作用及可能机制。方法采用随机分组对照研究的方法,将18只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组和实验组,每组6只。实验组连续3天灌胃酮脂,对照组和模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,第3天灌胃结束后30min对模型组和实验组小鼠腹腔注射LPS诱导脓毒症AKI,对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。24h后处死小鼠,取尿液、血浆和两侧肾脏。测定各组小鼠血酮水平;检测各组小鼠肾功能相关指标包括肌酐(serum creatinine,SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿微量白蛋白/尿肌酐(urine albumin/creatinine,UALb/Cr)和肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,KIM-1)的值;苏木精-伊红染色观察各组小鼠肾组织病理改变;检测氧化应激相关指标包括丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性;Western blot法检测各组小鼠肾组织中FoxO3a和SOD2蛋白水平。结果与对照组比较,模型组小鼠SCr、BUN、UALb/Cr和KIM-1水平均大幅升高,同时伴有明显的肾小管上皮细胞肿胀或脱落、间质水肿和肾小管扩张;组织MDA含量明显增加,SOD、GSH和CAT活性降低;FoxO3a和SOD2表达明显下降。与模型组小鼠比较,实验组小鼠血酮浓度上升,肾功能得到改善,肾组织病理损伤明显减轻,肾脏氧化应激损伤减轻,FoxO3a和SOD2表达有所升高。结论酮体可以通过抑制氧化应激对LPS诱导的脓毒症小鼠肾损伤起到保护作用,其机制可能是促进FoxO3a和SOD2抗氧化蛋白的表达。

摘要： 目的 探索中枢神经系统损伤和修复的机制.方法 制作大鼠TBI模型,取其脑组织进行免疫印迹分析和免疫组织化学,观察其中FoxO3a与p27的表达.结果 FoxO3a表达量在伤后3d显著下调,p27水平在伤后1d显著下降,二者表达呈正相关(r=0.902,P=0.002);FoxO3a染色在损伤3d后的对侧大脑中表达广泛,而在损伤侧大脑中染色水平较低.结论 FoxO3a和p27极有可能通过调控细胞周期参与神经系统损伤后修复过程.

摘要： 目的:检测FOXO3a在乳头状甲状腺癌(PTC)细胞系中的表达情况及亚细胞定位,以及在原发PTC中的表达情况,分析其与PTC患者临床病理特征以及预后的相关性.方法:通过Real-time RT-PCR和Western blot检测正常甲状腺细胞系HTORi3及PTC细胞系中FOXO3a mRNA和蛋白表达.通过免疫荧光染色检测其亚细胞定位.通过TCGA数据库中PTC临床及芯片数据分析FOXO3a在PTC及正常甲状腺组织中的表达情况,以及FOXO3a mRNA表达与PTC患者临床病理特征、其它遗传学异常及无复发生存期的相关性.结果:PTC细胞系中FOXO3a发生不同程度胞浆滞留.相较于正常甲状腺细胞系HTORi3,PTC细胞系中FOXO3a mRNA表达显著下调,其水平与肿瘤起源(单发或多发)、肿瘤大小、甲状腺包膜浸润及淋巴结转移无关,与BRAFV600E突变、RAS突变、RET重排无关,与患者无复发生存期无关.结论:相较于正常甲状腺细胞系HTORi3,FOXO3a mRNA表达在PTC细胞系中显著下调.FOXO3a mRNA与PTC患者临床病理特征及预后无显著相关性.

摘要： 目的 探讨FOXM1/FOXO3a在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义.方法 选择HBV相关性肝癌患者92例作为研究对象,取所有患者的病灶组织标本与癌旁组织标本,采用免疫组化法检测FOXM1、FOXO3a蛋白表达水平,调查患者的临床病理特征、预后并进行相关性分析.结果 在92例HBV相关性肝癌患者中,病灶组织的FOXM1、FOXO3a表达阳性率为72.8％和83.7％,都显著高于癌旁组织的33.7％和23.9％(P<0.05).不同组织学分化、临床分期、淋巴结转移、Child-Pugh分级患者的FOXM1、FOXO3a表达阳性率对比差异都有统计学意义(P<0.05).Pearson相关分析显示患者的组织学分化、临床分期、淋巴结转移、Child-Pugh分级与FOXM1、FOXO3a表达阳性率都存在相关性(P<0.05).所有患者随访到2020年8月1日,平均随访时间(25.82±1.38)个月,92例患者中死亡42例,死亡率为45.6％.COX回归分析显示组织学分化、临床分期、淋巴结转移与FOXM1、FOXO3a表达阳性率为影响患者预后死亡的主要因素(P<0.05).结论 乙肝相关性肝癌的发病与FOXM1/FOXO3a信号通路的激活密切相关,且其相关蛋白的表达与患者的临床病理特征显著相关,可作为患者预后死亡评估的重要指标.

摘要： 目的 研究创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)小鼠海马神经细胞内FoxO3a和LC3蛋白表达的变化.方法 采用单一连续刺激(single prolonged stress,SPS)方法建立PTSD小鼠模型,应用旷场实验、高架十字迷宫、Morris水迷宫3种行为学检测方法测试SPS刺激后小鼠的空间记忆能力和焦虑水平,通过Western blot法检测海马神经细胞自噬相关蛋白LC3、p62以及信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a的表达,并利用免疫荧光染色方法观察FoxO3a、LC3的表达水平.结果 行为学实验检测结果显示,与Control组比较,PTSD组小鼠焦虑水平升高及空间记忆受损(P<0.01);Western blot法和免疫荧光染色结果显示,PTSD组小鼠海马神经细胞p-Akt蛋白水平增加,FoxO3a蛋白表达增加,p-FoxO3a蛋白表达减少,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加,p62蛋白水平降低(P<0.05);海马神经细胞内FoxO3a和LC3荧光表达强度增加.结论 SPS刺激后PTSD小鼠海马神经细胞自噬增多,FoxO3a表达增加.

摘要： 目的：本实验拟采用C57BL/6小鼠强迫游泳实验作为抑郁症模型，研究FoxO3a的磷酸化水平在丙咪嗪的抗抑郁作用中的变化。rn 方法：给药后对小鼠进行强迫游泳实验，观察并记录测试阶段后4min小鼠的不动时间，强迫游泳结束后立即断头取脑，分离出海马、前额皮质、纹状体和杏仁核，用Western免疫蛋白印记检测这四个脑区中FoxO3a的磷酸化水平。rn 结果：丙咪嗪给药可以减少强迫游泳模型中小鼠的不动时间，同时升高杏仁核内FoxO3a的磷酸化。rn 结论：丙咪嗪在C57BL/6小鼠强迫游泳中显示出抗抑郁作用，其对杏仁核内FoxO3a磷酸化水平的升高可能参与了此抗抑郁作用。

摘要： 目的：本实验拟采用C57BL/6小鼠强迫游泳实验作为抑郁症模型，研究FoxO3a的磷酸化水平在丙咪嗪的抗抑郁作用中的变化。rn 方法：给药后对小鼠进行强迫游泳实验，观察并记录测试阶段后4min小鼠的不动时间，强迫游泳结束后立即断头取脑，分离出海马、前额皮质、纹状体和杏仁核，用Western免疫蛋白印记检测这四个脑区中FoxO3a的磷酸化水平。rn 结果：丙咪嗪给药可以减少强迫游泳模型中小鼠的不动时间，同时升高杏仁核内FoxO3a的磷酸化。rn 结论：丙咪嗪在C57BL/6小鼠强迫游泳中显示出抗抑郁作用，其对杏仁核内FoxO3a磷酸化水平的升高可能参与了此抗抑郁作用。

摘要： 目的：本实验拟采用C57BL/6小鼠强迫游泳实验作为抑郁症模型，研究FoxO3a的磷酸化水平在丙咪嗪的抗抑郁作用中的变化。rn 方法：给药后对小鼠进行强迫游泳实验，观察并记录测试阶段后4min小鼠的不动时间，强迫游泳结束后立即断头取脑，分离出海马、前额皮质、纹状体和杏仁核，用Western免疫蛋白印记检测这四个脑区中FoxO3a的磷酸化水平。rn 结果：丙咪嗪给药可以减少强迫游泳模型中小鼠的不动时间，同时升高杏仁核内FoxO3a的磷酸化。rn 结论：丙咪嗪在C57BL/6小鼠强迫游泳中显示出抗抑郁作用，其对杏仁核内FoxO3a磷酸化水平的升高可能参与了此抗抑郁作用。

摘要： 目的：本实验拟采用C57BL/6小鼠强迫游泳实验作为抑郁症模型，研究FoxO3a的磷酸化水平在丙咪嗪的抗抑郁作用中的变化。rn 方法：给药后对小鼠进行强迫游泳实验，观察并记录测试阶段后4min小鼠的不动时间，强迫游泳结束后立即断头取脑，分离出海马、前额皮质、纹状体和杏仁核，用Western免疫蛋白印记检测这四个脑区中FoxO3a的磷酸化水平。rn 结果：丙咪嗪给药可以减少强迫游泳模型中小鼠的不动时间，同时升高杏仁核内FoxO3a的磷酸化。rn 结论：丙咪嗪在C57BL/6小鼠强迫游泳中显示出抗抑郁作用，其对杏仁核内FoxO3a磷酸化水平的升高可能参与了此抗抑郁作用。

摘要： 本发明公开了H3K27me3调控FoxO1基因表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明通过研究H3K27me3对FoxO1基因表达的调控和FoxO1对卵巢颗粒细胞周期进程、增殖、凋亡及类固醇激素的分泌的影响，证明H3K27me3靶向结合FoxO1，抑制FoxO1的转录表达；激活H3K27me3抑制FoxO1基因的转录表达，抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和孕酮分泌，促进卵巢颗粒细胞的分裂、增殖和睾酮分泌；抑制H3K27me3促进FoxO1基因的转录表达，促进卵巢颗粒细胞的凋亡和孕酮分泌，抑制卵巢颗粒细胞的分裂、增殖和睾酮分泌；为H3K27me3和FoxO1基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控机制研究积累材料。

摘要： 本发明属于分子生物学检测领域，具体涉及一种FOXO1基因SNP标记检测藏鸡经济性状的方法及其应用。具体技术方案为：一种影响藏鸡性状的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于藏鸡FOXO1基因对参考序列Genbank Accession No.NC_006088.5的第3187位点的碱基处，突变碱基为T或G。本发明首次发现，藏鸡FOXO1基因第3187位处，如果发生T‑G突变，会直接关系到是否出现BTSI‑V2酶切位点；且GT基因型的个体，各方面的经济性状均有明显提升。因此，利用该突变位点可简单、快速、准确、高效地检测藏鸡的经济性状，并可直接应用到藏鸡选育中，以提升藏鸡的经济性能。

摘要： 本发明公开了FOXO3和TP53的甲基化位点组合及其作为迟发性哮喘诊断标志物的应用，本发明首次发现了FOXO3和TP53基因的DNA甲基化水平与哮喘严重程度及迟发性哮喘发生发展相关，对于解释迟发性哮喘的发病具有重要意义；本发明提供了一种诊断产品，通过检测外周血中FOXO3和TP53基因的DNA甲基化水平，实现迟发性哮喘的早期无创诊断，以期实现迟发性哮喘的早期治疗。本发明通过检测外周血中FOXO3和TP53基因DNA甲基化水平来用于临床哮喘患者病情的严重程度评估及迟发性哮喘的早期预测。相比现有检测手段而言，具有创伤小，检测便捷，敏感性高，患者接受程度高的优势。

摘要： 本发明提出了JNK信号通路抑制剂以及任选的mTOR信号通路抑制剂和嘧啶吲哚衍生物在上调造血干细胞FOXO1基因表达中的用途。由此，将JNK信号通路抑制剂以及任选的mTOR信号通路抑制剂和嘧啶吲哚衍生物作用于造血干细胞，可以有效地上调FOXO1基因表达，为FOXO1基因的调控提供了可靠的研究手段，为通过FOXO1调控造血干细胞功能的研究和临床应用奠定了基础，具有重要的科研和临床转化价值。

摘要： 本发明涉及一种草鱼FoxO1多肽抗原、抗体及其制备方法、应用，属于生物化学及分子免疫学技术领域。本发明对草鱼FoxO1全长功能蛋白质氨基酸序列的二级结构、免疫原性、亲疏水性、表面可及性等进行分析，发现草鱼FoxO1蛋白近N端有15个氨基酸抗原性、亲水性及表面可及性较强，因此将其作为合适的草鱼FoxO1多肽抗原。以该FoxO1多肽抗原为免疫原免疫新西兰兔制备得到了抗草鱼FoxO1多肽抗原的多克隆抗体，可特异性识别草鱼组织中FoxO1全长功能蛋白质，填补了草鱼FoxO1全长功能蛋白质检测研究领域的空白，为草鱼FoxO1全长功能蛋白质调控动物脂肪代谢功能的研究奠定基础。

摘要： 本发明属于生物技术与缺血性脑卒中领域，具体涉及一种环状RNA circ‑FoxO3在制备防治缺血性脑卒中产品中的应用。该环状RNA在人源或小鼠源型物种中高度保守，具有相同的反向剪切位点，本发明证实circ‑FoxO3在MCAO/R小鼠脑血管内皮细胞中，以及经OGD/R处理的脑血管内皮细胞系中高表达；通过敲低或过表达circ‑FoxO3，显示其在经OGD/R处理的内皮屏障中具有一定的保护作用。本发明为预防急性缺血性脑卒中后出血转化提供了新思路，为开发神经血管保护剂提供了新的靶点。

摘要： 本发明提供了一种抑制FOXO1基因表达的siRNA及其前体和应用，具体地，本发明提供了一种siRNA前体序列以及由其产生的siRNA，本发明的siRNA及其前体可有效治疗FOXO1基因相关的疾病。

摘要： 本发明公开了FOXO3a‑DRI肽段、其药物组合物及应用，所述肽段以FOXO3a的147‑179氨基酸序列作为肽段母版进行氨基酸逆向排序，对获得的FOXO3a 147‑179逆向序列进行全D型合成得到；所述FOXO3a‑DRI肽段具有显著减少尿蛋白，改善足细胞凋亡与损伤，抑制肾小球损伤与肾脏纤维化和DKD进展的作用，可用于制备有效治疗或预防DKD的药物，有效推进了治疗或预防糖尿病肾病药物的研究进展。

摘要： 本发明属于分子生物学检测领域，具体涉及一种FOXO1基因SNP标记检测藏鸡经济性状的方法及其应用。具体技术方案为：一种影响藏鸡性状的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于藏鸡FOXO1基因对参考序列Genbank Accession No.NC_006088.5的第3187位点的碱基处，突变碱基为T或G。本发明首次发现，藏鸡FOXO1基因第3187位处，如果发生T‑G突变，会直接关系到是否出现BSTI‑VⅡ酶切位点；且GT基因型的个体，各方面的经济性状均有明显提升。因此，利用该突变位点可简单、快速、准确、高效地检测藏鸡的经济性状，并可直接应用到藏鸡选育中，以提升藏鸡的经济性能。

摘要： 本发明属于生物技术与缺血性脑卒中领域，具体涉及一种环状RNA circ‑FoxO3在制备防治缺血性脑卒中产品中的应用。该环状RNA在人源或小鼠源型物种中高度保守，具有相同的反向剪切位点，本发明证实circ‑FoxO3在MCAO/R小鼠脑血管内皮细胞中，以及经OGD/R处理的脑血管内皮细胞系中高表达；通过敲低或过表达circ‑FoxO3，显示其在经OGD/R处理的内皮屏障中具有一定的保护作用。本发明为预防急性缺血性脑卒中后出血转化提供了新思路，为开发神经血管保护剂提供了新的靶点。